Толь тг 350: Толь гидроизоляционный ТГ 350: ГОСТ и характеристики

Содержание

Толь гидроизоляционный ТГ 350: ГОСТ и характеристики

Сейчас производится множество покрытий, которые можно использовать для создания слоя гидроизоляции при работах с основанием дома или кровлей, а также других видах. Но наиболее популярным и часто используемым является толь. Его выделяют среди других покрытий особенности, которые и диктуют использование материала.

Благодаря таким качествам, как огнестойкость, прочность, стойкость к образованию гнили и плесени и доступная цена, материал широко используют в строительстве частных домов и хозяйственных построек.

Разновидности толя


Изготавливается толь на картонной основе, которая обработана таким образом, что способна отталкивать влагу. Специального назначения картон смачивается смолой каменного угля с различными добавками, а сверху посыпается минеральной крошкой мелкой или крупной фракции.

Также существует толь марки ТГ, который не имеет на поверхности никаких дополнительных посыпок и используется как подкладка для проведения других работ и гидроизоляционного или пароизоляционного покрытия. Также его часто применяют для создания первого кровельного слоя.

Существует несколько разновидностей толя:

  1. С посыпкой, отличающейся крупной фракцией. Покрытие часто используют как второй слой кровельного материала на кровлях с небольшим уклоном или плоских. Поверхность толя полностью усыпана крупнозернистой минеральной посыпкой, а снизу выполняется напыление или мелкозернистая посыпка. Толь с крупнозернистой посыпкой изготавливается под марками ТКК-350 и ТКК-400.
  2. Кровельный толь. Этот материал укладывают на кровлю в качестве нижнего или верхнего слоя. Он имеет мелкозернистую песчаную посыпку с обеих сторон. Выпускаемые марки такого толя ТПК-350, ТПК-400.
  3. Гидроизоляционный толь. Такой вариант материала наиболее дешевый и выпускается без посыпки или с мелкозернистыми компонентами. Наиболее распространенными его разновидностями являются ТКК-350, ТКК-400. Помимо этого, выпускаются такие марки, как ТКП-350, ТОП-500 и ТГ-350К. Данный вид покрытия применяется для выполнения гидроизоляционных работ на фундаменте или кровле.

Особенности изготовления толя


Основой толя является кровельный картон, толщина которого составляет от 1 до 1,7 мм с пропиткой натуральной или искусственной смолой от каменного угля. Смола перед пропиткой картона проходит определенную обработку, которая заключается в извлечении из нее влаги. Готовая смола растапливается в специальных контейнерах, через которые пропускаются рулоны картона.

Смола в таком состоянии имеет температуру в сотню градусов. После того как картон пропитается, лишняя смола убирается с двух сторон специальными валиками, которые имеют диаметр около 15 см. Они вращаются в результате чего лишняя смола снимается, а выходит только почти готовый толь. После этого он посыпается песком с двух сторон, чтобы материал стал более прочным и огнестойким, а также не слипался при нахождении в рулоне.

Высушиваются обработанные листы при помощи горячего топочного газа и сматываются в бобины, которые оставляются на некоторое время для выстаивания. После готовности материала, он сматывается в рулоны и на них проставляется соответствующая маркировка и вся сопутствующая информация.

Марка толя ТГ-350 и его характеристики


Толь гидроизоляционный с такой маркировкой используется для проведения гидроизоляционных работ для стен и фундамента. Выпускается без посыпки и является наиболее дешевым и распространенным материалом для гидроизоляции.

Важно! Использовать толь ТГ-350 можно даже для обработки подземных участков конструкций.

Марка толя ТГ-350 имеет все необходимые сертификаты соответствия и по техническим условиям соответствует стандарту ГОСТ 10999-76, по которым данный материал имеет следующее описание – это картон для технических целей, который пропитывается смолой из угля каменного типа или сланца. Выпускается в рулонах для предотвращения залома материала.

Отличие толя от рубероида и его применение


Толь используется часто, но все же, большинство работ по гидроизоляции производится с использованием рубероида. Это связано с тем, что рубероид хоть и имеет картонную основу, но пропитывается, как правило, битумом. А такая обработка делает материал более долговечным и прочным.

Именно поэтому толь применяется там, где важно на время оформить гидроизоляцию с минимальными затратами. Но некоторые свойства толя, например, такие как паронепроницаемость, водостойкость и устойчивость к процессам развития гнили все-таки позволяют использовать материал и для других строительных работ.

Обычно толь, особенно тот, который имеет крупнозернистую посыпку, используется в качестве чернового материала для временного покрытия кровель. Помимо этого, толь ТГ-350 может быть использован для защиты стен от влаги, а также улучшения эффекта от теплоизоляции.

Укладывают покрытие в 2 слоя, так как один не сможет выдержать и сезона. Первый слой нужно выполнять на сухую, а последующие уже клеятся при помощи специальной смолы или же битумной мастики. Выполнять первый слой нужно на подготовленную поверхность, на которую заранее укладывается подстилающий слой.

Рулоны материала хранят в вертикально. Срок их хранения составляет 1 год. По истечении этого времени материал теряет свои качества и технические характеристики и уже не сможет защитить от внешних воздействий в полной мере.

Профессиональные строители, которые время от времени используют толь, говорят, что часто возникает проблема неполной пропитки материала, в результате чего он надрывается. Если при покупке наблюдаются на видимой части рулона пустые участки, то лучше всего воздержаться от такой покупки, так как материал не соответствует требованиям стандарта и не сможет полноценно выполнять все возложенные на него функции.

Заключение


Для создания временной гидроизоляции или чернового покрытия кровли может быть использован толь. Этот материал недорогой и отлично справится с защитой от влаги на некоторое время. Но все же, для более капитальных работ, следует подобрать что-то более основательное с наилучшими качественными характеристиками.

Что еще почитать по теме?

Автор статьи:

Сергей Новожилов — эксперт по кровельным материалам с 9-летним опытом практической работы в области инженерных решений в строительстве.

Понравилась статья? Поделись с друзьями в социальных сетях:

Facebook

Twitter

Вконтакте

Одноклассники

Google+

Толь гидроизоляционный ТГ 350 — разъясняем развернуто

Содержание

Толь — кровельный и гидроизоляционный материал. В зависимости от разновидности, он подходит для обустройства верхних и нижних слоев кровли, а также в качестве гидро- и пароизоляции строительных сооружений.

По причине слабой прочности и низкой жаростойкости, толь, обычно, применяют в обустройстве крыш технических сооружений и хозяйственных построек, а также как подкладочный слой под пол, плиточку в ванной и т.д.

Блок: 1/7 | Кол-во символов: 438
Источник: https://mainavi.ru/strojmaterialy/tol/

Описание строительного материала

Толь относится к многочисленной категории материалов на основе картона, обладающих водозащитными свойствами. Кровельный картон пропитывается каменноугольной смолой и обрабатывается песочной посыпкой (марка ТПК) или крупнозернистой посыпкой (марка ТВК).

Производится также толь совсем без какой-либо посыпки (марки ТК и ТГ). Его используют в качестве подкладочного, влагозащитного и пароизоляционного материала, либо в качестве первого слоя кровли.

Блок: 2/8 | Кол-во символов: 481
Источник: http://stroyres.net/vyazhushhie-materialy/organicheskie/tol

Что это такое?

Что такое толь? Толь — это материал из особого картона, дважды пропитанного каменноугольным, либо сланцевым дегтевым веществом. После обработки материал со всех сторон посыпается песком, либо крупнозернистой присыпкой. Свойства дегтевого продукта в данном случае служат защитой картона от гниения.

В зависимости от разновидности толя, температура смягчения пропитки может колебаться от 26 до 58 градусов. При минусовых показателях материал становится ломким.

Способ упаковки и хранения толя — рулон.

Блок: 2/7 | Кол-во символов: 518
Источник: https://mainavi.ru/strojmaterialy/tol/

Разновидности


Толь имеет свои разновидности, которые различаются качеством и количеством подсыпки. Толь, на который наносится подсыпка крупной фракции используется во время кровельных работ. Он укладывается вторым слоем на кровлях с небольшим углом. Подсыпка наносится в два слоя. Первый находится на лицевой стороне толя, а второй на нижней. На верхнюю часть толя укладывается крупнозернистый песок, а на изнаночную сторону – минеральная мелкозернистая присыпка. Если потребуется именно такой толь, то необходимо искать маркировку ТКК 400 и ТКК 350.

Толь этих марок отличается по некоторым физическим характеристикам. И тот и другой рулон способны покрыть площадь в 10 квадратных метров. Но вес рулона первого вида толя на 2 кг больше, чем у ТКК 350 и составляет 25 кг. Температура, при которой лучше производить укладку составляет 26 градусов. Именно при ней толь обладает хорошей эластичностью и легко принимает форму поверхности. Каждый из этих вариантов изготавливается по ГОСТ.

Если требуется выполнить гидроизоляцию поверхности, тогда подойдет толь с маркой ТКП 350 или ТОП 500. Первый вариант толя имеет мелкозернистую подсыпку, которая защищает от механических повреждений. Одним рулоном толя можно покрыть большую площадь, чем у предыдущего вида материала, она составляет 15 квадратных метров. Температура достижения эластичного состояния несколько выше и составляет 45 градусов. Вес одного рулона такого толя ниже, чем у предыдущих вариантов и равняется 22 кг. Окончательное решение об уместности применения такого гидроизоляционного материала принимается, исходя из местных климатических условий.

Совет! Если требуется высокий результат при гидроизоляции кровли, то лучше использовать марки толь ТК.

Последней разновидностью толя, который применяется для гидроизоляции поверхностей является ТГ 350. Его преимуществом является невысокая цена по сравнению с конкурентами. У этого вида толя отсутствует минеральная присыпка. Этот фактор и определяет область использования. Рулонный материал марки ТГ прекрасно подходит для осуществления гидроизоляции кровли и фундамента. Изготовление толя марки ТГ 350 имеет четкий регламент, который описан в стандарте с номером 10999/76. Производитель должен провести требуемые испытания. Одним из них является уровень влагопоглощения толя. Толь на сутки помещается в воду, если за это время материал впитывает больше 25% влаги, тогда он не подходит для использования в качестве гидроизолятора.

Обратите внимание! Каждый рулон толя имеет центральные отверстия, через которые просто осуществляется его транспортировка и разматывание во время укладки.

Блок: 3/8 | Кол-во символов: 2598
Источник: https://2proraba.com/krysha/tol-gidroizolyacionnyj-marki-tg-350.html

ГОСТ 10923-93. Рубероид. Технические условия (с Изменением N 1)

Площадь обыденного рулона составляет 10 м2. Вес 23 и 25 кг.

  • ТГ-300 и ТГ-350 — водоизоляционные марки толя. На наружной части есть слой защиты с тонкодисперсной минеральной присыпкой. Нижняя часть покрыта тонкодисперсной, или пылевидной минеральной присыпкой. Площадь обыденного рулона составляет 15 м2. Вес 22 и 24 кг.
  • Эти марки толя при монтаже клеятся мастикой.

    В протяжении многих лет толь оставался одним из более нужных материалов для обустройства кровли, защиты от воды подвалов, фундамента дома и других зданий. Для действенной гидроизоляции подземных помещений и других конструкций, обустроенных под землей, в большинстве случаев применяется толь ТГ-350.

    Блок: 3/13 | Кол-во символов: 740
    Источник: https://astgift.ru/tol-tg-350/

    Производство толя

    Для производства толя используют искусственную или каменноугольную смолу, а также рулонный картон толщиной 1-1,7 мм. Перед использованием из каменноугольной смолы извлекают излишки влаги путем вымораживания. К производителям поступает уже готовая к пропитке смола. Ее растапливают в специальных ваннах, через которые протягиваются полосы картона.

    Ванна для пропитки имеет глубину около 0,8 м, ширину — 1,2 м, а ее длина равняется 3-4 м. Температура смолы в ванне достигает 100 градусов. На выходе из ванн излишки смолы удаляются с полос посредством двух валиков, имеющих диаметры 15 см. Валики вращаются навстречу друг другу, а сила их прижима регулируется рычагом.

    Пропитанный смолой толь посыпается с обеих сторон сухим песком. Песок повышает прочность материала, повышает его огнестойкость и предотвращает слипание при нахождении в рулонах. Толь сушится горячими топочными газами. После просушки материал сматывается в бобины для выстаивания, после чего перематывается в стандартные рулоны определенной длины. Рулоны упаковываются с нанесением на них маркировки.

    Из чего состоит толь показано на схеме

    Блок: 4/8 | Кол-во символов: 1124
    Источник: http://stroyres.net/vyazhushhie-materialy/organicheskie/tol

    Заключение

    Как видите, толь имеет право быть и успешно используется в строительстве. Во многих случаях его используют при возведении разных построек хозяйственного назначения. Это связано с тем, что для построек жилого назначения нужно подбирать материалы, которые прослужат намного дольше. Перед началом укладки рулоны нужно раскатать и сделать вырезы для тех элементов, которые будут на поверхности. После этого рулон следует заново скатать и размотать по мере нанесения клеевой смеси. Иногда идеальный вариант – это раскатывания рулона материала с середины к краю кровли или иной поверхности.

    ТОП 9 магазинов, где я выгодно закупаюсь
    ТОП 7 по товарам и мебели для дома:
    7 лучших строительных и мебельных магазинов!

    Блок: 3/3 | Кол-во символов: 750
    Источник: https://domsdelat.ru/krisha/tol-gidroizolyacionnyj-tg-350-gost-instrukciya-foto-i-video.html

    Разновидности толя


    Изготавливается толь на картонной основе, которая обработана таким образом, что способна отталкивать влагу. Специального назначения картон смачивается смолой каменного угля с различными добавками, а сверху посыпается минеральной крошкой мелкой или крупной фракции.

    Также существует толь марки ТГ, который не имеет на поверхности никаких дополнительных посыпок и используется как подкладка для проведения других работ и гидроизоляционного или пароизоляционного покрытия. Также его часто применяют для создания первого кровельного слоя.

    Существует несколько разновидностей толя:

    1. С посыпкой, отличающейся крупной фракцией. Покрытие часто используют как второй слой кровельного материала на кровлях с небольшим уклоном или плоских. Поверхность толя полностью усыпана крупнозернистой минеральной посыпкой, а снизу выполняется напыление или мелкозернистая посыпка. Толь с крупнозернистой посыпкой изготавливается под марками ТКК-350 и ТКК-400.
    2. Кровельный толь. Этот материал укладывают на кровлю в качестве нижнего или верхнего слоя. Он имеет мелкозернистую песчаную посыпку с обеих сторон. Выпускаемые марки такого толя ТПК-350, ТПК-400.
    3. Гидроизоляционный толь. Такой вариант материала наиболее дешевый и выпускается без посыпки или с мелкозернистыми компонентами. Наиболее распространенными его разновидностями являются ТКК-350, ТКК-400. Помимо этого, выпускаются такие марки, как ТКП-350, ТОП-500 и ТГ-350К. Данный вид покрытия применяется для выполнения гидроизоляционных работ на фундаменте или кровле.

    Блок: 2/6 | Кол-во символов: 1527
    Источник: http://ProRoofer.ru/material/tol-gidroizolyacionnyj-tg-350.html

    Плюсы и минусы


    Учитывая приведенные выше факторы, легко составить небольшой список плюсов и минусов толя. К первым можно отнести:

    • небольшой вес;
    • низкая стоимость;
    • простота укладки;
    • химическая устойчивость;
    • хороший изолятор.

    При желании рулон толя можно поднять самостоятельно к месту проведения работ. Многие останавливаются на толе именно в силу невысокой стоимости материала. Толь неплохо переносит воздействия некоторых химических элементов. В особенности это касается тех, что выпадают с дождевой водой. Нет необходимости беспокоиться, что она сможет разрушить толь. Толь также минимально подвержен и биологическому воздействию, которое может быть оказано бактериями, находящимися в грунте. Из минусов изделия можно выделить:

    • малую прочность;
    • небольшой срок службы;
    • подверженность температурным воздействиям.

    В сравнении с современными материалами, в основе которых лежит стекловолокно или стеклохолст, толь обладает наименьшей прочностью, поэтому при его укладке необходимо быть предельно внимательным. Следствием такой особенности является небольшой срок службы толя, если ему постоянно придется испытывать нагрузки. Толь размягчается при небольших температурах, поэтому его нельзя оставлять под открытыми солнечными лучами.

    Обратите внимание! Если не соблюсти порядок укладки толя как самостоятельного кровельного материала, тогда срок его службы не превысит одного сезона. Следствием этого станут дополнительные затраты на кровельный материал, который потребуется при ремонте или замене старого.

    Блок: 5/8 | Кол-во символов: 1507
    Источник: https://2proraba.com/krysha/tol-gidroizolyacionnyj-marki-tg-350.html

    Отличие толя от рубероида

    Толь нередко ассоциируют с рубероидом, так как оба материала имеют общую, картонную базу. Рассмотрим отличия толя от рубероида.

    Главное отличие заключается в пропитке, а как раз:

    • рубероид пропитывается водянистым битумом;
    • толь пропитывается дегтевым продуктом.

    Рубероид более долговечен и прочен. Но толь имеет огромную устойчивость к тлению, наилучшую водоустойчивость.

    Похожие записи

      Пескобетон

      Смесь пескобетон используют для обустройства прочных полов в подсобных и производственных помещениях, в подвалах и мастерских. Его можно использовать при разработке отливов, фундаментов в качестве тонкодисперсного бетона (как раз к этой категории бетонов он относится согласно систематизации ГОСТ). Он прекрасно подходит для бетонирования лестниц, обработки соединений, швов. Его берут в качестве базы при ремонте бетонных

      Пенобетон

      Пенобетон – материал, обширно применяющийся в строительстве благодаря своим положительным свойствам и применимой цены. Имеет ряд различий от традиционного бетона. Сначала это, естественно, другая структура, а как раз – ячеистая, пузыристая, пористая – используются разные определения. По составу отличается от бетона тем, что имеет в наличии пенообразователь. Как правило это СДО (смола древесно-омыленная). Необходимо отметить,

      Клей ПВА

      На 95% клей ПВА состоит из поливинилацетата, в который время от времени добавляют пластификаторы, загустители и разные мотивированные добавки. Состав подобного продукта обычно находится в зависимости от его назначения. Сейчас различают несколько главных видов клея: Обойный. Он предназначается для фиксации картонных и моющихся обоев на всех типах поверхностей; Универсальный. Этот тип клея предназначается для склеивания

    Главная / Справочник строителя / Строительные материалы, конструкции и изделия / Изол

    Блок: 6/13 | Кол-во символов: 1811
    Источник: https://astgift.ru/tol-tg-350/

    Толь гидроизоляционный марки тг 350 характеристики

    Срок хранения бризола не должен превышать 4 месяцев со дня изготовления.

    «Справочник строителя», М.С.Екельчик

    Правила по экономному расходованию цемента

    Приготовление бетонов и растворов должно производиться с широким применением местных вяжущих материалов. Для бетонных и железобетонных конструкций зданий и сооружений с сухим или нормальным температуро-влажностным режимом и без агрессивной среды рекомендуются бетоны, приготовленные с применением извести (например, автоклавные силикатные бетоны), гипса, молотых шлаков, золы-уноса, золошлаковых смесей и других бесклинкерных вяжущих (в качестве компонентов смешанных вяжущих…

    Пластифицированные и гидрофобные портландцементы

    Для приготовления бетонных и растворных смесей следует широко применять пластифицированные и гидрофобные портландцементы, а при использовании цементов, не содержащих пластифицирующих или гидрофобизирующих добавок, вводить в бетонную и растворную смеси в процессе их приготовления добавки: концентрат сульфитно-дрожжевой бражки, мылонафт, асидол, нейтрализованный черный контакт (НЧК), смолу нейтрализованную воздухововлекающую (СНВ), кремнийорганические добавки (ГКЖ-10, ГКЖ-11, ГКЖ-94 и типа этилгидридсилсесквиоксан…

    Применение мокрой штукатурки

    Применение мокрой штукатурки допускается в соответствии с требованиями, приведенными в Указаниях по ограничению применения штукатурки в строительстве: оштукатуривание ограждающих конструкций помещений с повышенной влажностью воздуха (ванных комнат, санитарных узлов, прачечных, бань, помещений производственных зданий с мокрым технологическим процессом и т. п.) должно применяться с применением цементных и цементно-известковых растворов; наружная штукатурка каменных стен зданий должна…

    Правила по экономному расходованию основных строительных материалов

    Госстрой СССР утвердил Технические правила по экономному расходованию основных строительных материалов (ТП 101—73), которые применяются с г. вместо ТП 101—70. Кроме тою, решено признать утратившими силу с г. постановления Госстроя СССР от г. «О дополнении Технических правил по экономному расходованию основных строительных материалов», от 17 июля…

    Изготовление стальных конструкций

    Стальные конструкции следует изготовлять сварными, с применением автоматической и полуавтоматической сварки. Монтажные соединения элементов стальных конструкций должны выполняться с применением высокопрочных болтов и болтов повышенной и нормальной точности, а листовых конструкций — сварными. Для станционных платформ железных дорог и метрополитенов, километровых, предельных и пикетных столбов, ограждающих, сигнальных и путевых знаков и указателей, а также для…

    Толь в Энциклопедическом словаре:
    Толь — (франц. tole) — кровельный и гидроизоляционный материал, получаемыйпропиткой кровельного картона каменноугольными или сланцевыми дегтевымипродуктами.

    Выпускается в рулонах. Толь изготовляют из кровельного картона согласно (ГОСТ 10999—76), пропитывают дважды дегтевыми продуктами и  покрыта с двух сторон битумом и крупнозернистой или песчаной посыпкой. Деготь, предотвращающим гниение картона. Стойкость против гниения объясняется высокой токсичностью содержащегося в дегте фенола (карболовой кислоты). Изготовляют толь разных названий и марок.

    Виды толи

    Толь с песчаной посыпкой с обеих сторон для верхнего и нижнего слоев кровельного ковра изготовляется двух марок: ТКП-350 и ТКП-400. Площадь рулона—15 м2, масса — 26 и 28 кг.Температура размягчения пропиточного состава для  ТКП-350 и 400 около 38—42

    Толь с крупнозернистой посыпкой имеет на одной стороне (лицевой) защитный слой крупнозернистой посыпки, на нижней — мелкозернистой или пылевидной минеральной посыпки, применяют для верхнего слоя кровельного ковра. Изготовляют двух марок: ТКК-350 и ТКК-400. Площадь рулона—10 м2, масса—23 и 25 кг. Температура размягчения пропиточного состава для ТКК-350 и 400 соответсвенно 26—28°С.

    Толь гидроизоляционный с покровной пленкой пропиточного состава на лицевой стороне имеет защитный слой с мелкозернистой минеральной посыпкой, на нижней —с мелкозернистой или пылевидной минеральной посыпкой.  Изготовляют двух марок: ТГ-300 и ТГ-350. Площадь рулона—15 м2, масса— 22 и 24 кг.

    Блок: 8/13 | Кол-во символов: 4261
    Источник: https://astgift.ru/tol-tg-350/

    Изол

    Изол (ГОСТ 10296—71) — безосновный рулонный гидроизоляционный и кровельный материал, получаемый из резинобитумного вяжущего, пластификатора, наполнителя и антисептика. В качестве минеральной посыпки применяют тонкомолотые тальк, мел и талькомагнезит. Рулоны изола должны быть уложены в горизонтальном положении правильными рядами и храниться в сухих закрытых складах.

    Технические требования к кровельным и гидроизоляционным материалам

    Рулонный материал и его применениеГостМаркаВид посыпкиПлощадь рулона, м2Вес рулона, кг
    Рубероид кровельный — для верхнего слоя кровельного ковра 10923—64* РК-420 Крупнозернистая с одной стороны 10±0,5 27
    Рубероид кровельный — для верхнего слоя кровельного ковра 10923—64* РК-350 Крупнозернистая с одной стороны 10±0,5 25
    Рубероид кровельный — для верхнего слоя кровельного ковра 10923—64* РЧ-350 Чешуйчатая с одной стороны 15±0,5 26
    Рубероид кровельный — для верхнего слоя кровельного ковра 10923—64* РМ-350 Мелкая минеральная с двух сторон 15±0,5 26
    Рубероид подкладочный для нижних слоев кровельного ковра 10923—64* РП-250 Мелкая минеральная с двух сторон 20±0,5 22
    Толь-кожа для кровель и пароизоляции 10999—64* ТК-350 Без покровного слоя и посыпки 30 ±0,5 20
    Толь гидроизоляционный 10999—64* ТГ-350 Без покровного слоя и посыпки 30 ±0,5 20
    Толь для верхнего и нижнего слоев кровли 10999—64* ТГ-350 Песочная на обеих сторонах 15±0,5 18
    Толь для верхнего слоя кровельного ковра 10999—64* ТВК-350 Крупнозернистая на обеих сторонах 10±0,5 20
    Толь для верхнего слоя кровельного ковра 10999—64* ТВК-420 Крупнозернистая на обеих сторонах 10±0,5 25
    Пергамин только для нижних слоев 2697-64 П-350 Беспокровный 20±0,5 15
    Изол гидроизоляционный и кровельный материал 10296-71 Минеральная посыпка ±0,5
    Бризол для антикоррозийной защиты 17176-71 БР-17 Минеральный порошок (мел, асбест) 21±0,5
    БР-С
    Стеклорубероид для оклеечной гидроизоляции (верхнего слоя ковра) 15879-70 С-PK Крупнозернистая с лицевой стороны или пылевидная посыпка с нижней стороны 10±0,5 29
    Стеклорубероид для оклеечной гидроизоляции (верхнего слоя ковра) 15879-70 С-РЧ Чешуйчатая с лицевой стороны и мелкая посыпка с нижней стороны 10±0,5 23
    Стеклорубероид для нижних слоев кровельного ковра 15879-70 С-РМ Мелкая посыпка с двух сторон 10 ±0,5 23

    Бризол

    Бризол (ГОСТ 17176—71) —безосновный рулонный материал, изготовляемый методом вальцевания и последующего коландрирования смеси, состоящей из нефтяного битума, дробленой резины, асбеста и пластификатора.

    Бризол предназначается для антикоррозийной защиты подземных стальных трубопроводов, а также для гидроизоляции подземных сооружений.

    При хранении бризола рулоны устанавливаются на торец в 2 ряда по высоте. При устройстве настила для установки второго ряда рулонов, настил не должен опираться на нижний ряд рулонов бризола. При хранении рулонов бризола на месте производства работ они должны быть закрыты брезентом или кровельным материалом.

    Блок: 7/13 | Кол-во символов: 3400
    Источник: https://astgift.ru/tol-tg-350/

    Резюме


    Как видно, толь имеет право на существование и с успехом применяется в строительстве. В большинстве случаев толь используется при возведении различных хозяйственных построек. Это связано с тем, что для жилых зданий подбирается материал, способный прослужить значительно дольше. Перед укладкой рулоны толя необходимо раскатать и сделать необходимые вырезы согласно элементам, которые будут встречаться на поверхности. После этой процедуры рулон толя снова сматывается и разматывается уже по мере нанесения клеящего состава. В некоторых случаях лучшим вариантом будет раскатывать рулон толя с середины к краям кровли или другой поверхности.

    Блок: 8/8 | Кол-во символов: 647
    Источник: https://2proraba.com/krysha/tol-gidroizolyacionnyj-marki-tg-350.html

    Оценки

    По оценкам строителей, использующих толь в процессе своей деятельности, отмечается недостаточное качество готового материала. Зачастую картон не полностью пропитан смолой, что видно при его надрыве. Такое несоответствие имеющимся требованиям исходит из экономии пропиточного материала, при использовании картона недостаточной толщины, а также при несоблюдении технологии изготовления толя.

    Блок: 8/8 | Кол-во символов: 398
    Источник: http://stroyres.net/vyazhushhie-materialy/organicheskie/tol

    ГОСТ 10999-64

    Кровельный пергамин Этот беспокровный подкладочный материал предназначен для нижних слоев кровельного ковра из рубероидного покрытия. Изготавливают кровельный пергамин из картона путем пропитки нефтяным битумом. Выпускают следующие марки этого материала: П-ЗОО и П-350. Реализуется пергамин рулонами по 20-40 м2 и массой 13-30 кг.

    Помогает сертификат толь крупнозернистая посыпкой гидроизоляционная марки тг-350 шум и потребление электроэнергии. В продажу поступит уже в декабре этого года. Площадь рулона — 15м 2, масса — 26 и 28 кг. С помощью программы можно с лёгкостью спроектировать любую металлоконструкцию как. Толь марки тг-350 сертификат 0,0014. Толь с крупнозернистой посыпкой марки ТВК-350. Сертификат соответствия № РОСС RU.11.АЯ02.Н24712 № 0165314. Теперь ее можно использовать не только для бронирования. Торговая марка «Автолюкс». Тираж: 12 000 экз..

    Толь Толь изготавливают из кровельного картона путем двойной пропитки дегтевыми продуктами. Этот рулонный материал выпускается беспокровным (толь-кожа) и с крупнозернистой и песчаной посыпкой. Кровельный толь предназначен для устройства верхнего и нижнего слоев кровельного ковра. Гидроизоляционный толь служит для изоляции различных элементов строения. Беспокровный толь (толь-кожа) марок ТК-350 и ТГ-350 служит для тех же целей, что и пергамин. В некоторых случаях он применяется для устройства нижнего слоя ковра из толя с песчаной посыпкой.

    Толь с песчаной посыпкой с обеих сторон предназначен для устройства верхнего и нижнего слоев кровельного ковра. Этот материал выпускается двух марок: ТКП-350 и ТКП-400 (площадь рулона — 15 м2, масса — 23-25 кг). Толь с крупнозернистой посыпкой выпускается двух марок: ТКК-350 иТКК-400 (площадь рулона — 10 м2, масса — 23-25 кг). Он имеет на лицевой стороне защитный слой из крупнозернистой посыпки, а на обратной — из пылевидной минеральной. Этот материал предназначен для верхнего слоя кровельного ковра. Толъ гидроизоляционный с покровной пленкой пропиточного состава с лицевой стороны имеет защитный слой с Мелкозернистой минеральной посыпкой. Нижний слой этого материала покрыт мелкозернистой или пылевидной посыпкой.

    Промышленность выпускает следующие марки толя: ТГ-300 и ТГ-350 (площадь рулона — 15 м2, масса — 22-24 кг). Такой толь применяют для гидроизоляции и пароизоляции конструкций строений. Может также использоваться для устройства нижнего слоя кровельного ковра.

    Хранить рулоны толя следует в вертикальном положении не более года со дня выпуска. В таблице 1 указана температура размягчения пропиточного состава различных марок толя. В зависимости от вида вяжущего материала рулонные материалы можно разделить на битумное, дегтярные и полимерные. Наибольшее распространение в качестве рулонного; материала для покрытия кровли получил рубероид. Процесс изготовления рубероида включает следующие основные технологические операции: — пропитка кровельного картона мягкими нефтяными.

    —нанесение на обе стороны полотна тугоплавкого нефтяного битума с наполнителем — нанесение различной посыпки. По предназначению все сорта этого мягкого рулонного, материала делятся на: —кровельные; —подкладочные; — гидроизоляционные.

    Существуют следующие виды рубероида. Рубероид кровельный с крупнозернистой посыпкой применяется для верхнего и нижнего слоев кровельного ковра, а также для устройства гидроизоляции. Площадь рулона составляет 10 м2, масса – 25~27 кг. Таня Гроттер И Исчезающий Этаж Ключ К Игре.

    ТОЛЬ

    ТОЛЬ — рулонный кровельный материал, получаемый обработкой кровельного картона дегтевыми составами (см. Вяжущие материалы). В Советском Союзе выпускают 3 вида толя: кровельный с посыпкой песком с обеих сторон, беспокровный (неправильное название толь-кожа) — без посыпки и с крупнозернистой посыпкой (односторонней). Толь кровельный с посыпкой песком изготовляют, пропитывая картон в ванне, в которую подается по трубопроводу расплавленная смесь каменноугольных дегтя и пека.

    Блок: 12/13 | Кол-во символов: 3914
    Источник: https://astgift.ru/tol-tg-350/

    Кол-во блоков: 20 | Общее кол-во символов: 25199
    Количество использованных доноров: 6
    Информация по каждому донору:
    1. https://2proraba.com/krysha/tol-gidroizolyacionnyj-marki-tg-350.html: использовано 3 блоков из 8, кол-во символов 4752 (19%)
    2. http://stroyres.net/vyazhushhie-materialy/organicheskie/tol: использовано 3 блоков из 8, кол-во символов 2003 (8%)
    3. https://astgift.ru/tol-tg-350/: использовано 5 блоков из 13, кол-во символов 14126 (56%)
    4. https://domsdelat.ru/krisha/tol-gidroizolyacionnyj-tg-350-gost-instrukciya-foto-i-video.html: использовано 1 блоков из 3, кол-во символов 750 (3%)
    5. https://mainavi.ru/strojmaterialy/tol/: использовано 3 блоков из 7, кол-во символов 2041 (8%)
    6. http://ProRoofer.ru/material/tol-gidroizolyacionnyj-tg-350.html: использовано 1 блоков из 6, кол-во символов 1527 (6%)

    Источник: m-strana.ru

    Толь с крупнозернистой посыпкой марки ТВК 350 – тг 350 ГОСТ

    ГОСТ 10923-93. Рубероид. Технические условия (с Изменением N 1)

    ГОСТ 10923-93
    Группа Ж14

    МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
    РУБЕРОИД
    Технические условия

    Ruberoid. Specifications

    МКС 90.100.99*
    ОКП 57 7410
    ____________________
    * В указателе «Национальные стандарты» 2008 г.
    МКС 91.100.99. — Примечание изготовителя базы данных.

    Дата введения 1995-01-01

    Предисловие

    1 РАЗРАБОТАН Научно-производственным объединением «Полимерстройматериалы» Российской Федерации
    ВНЕСЕН Госстроем России

    2 ПРИНЯТ Межгосударственной научно-технической комиссией по стандартизации и техническому нормированию в строительстве (МНТКС) 10 ноября 1993 г.
    За принятие голосовали:

    Наименование государства

    Наименование органа государственного управления строительством

    Азербайджанская Республика

    Госстрой Азербайджанской Республики

    Республика Армения

    Госупрархитектуры Республики Армения

    Республика Белоруссия

    Госстрой Республики Белоруссия

    Республика Казахстан

    Минстрой Республики Казахстан

    Киргизская Республика

    Госстрой Киргизской Республики

    Республика Молдова

    Минархстрой Республики Молдова

    Российская Федерация

    Госстрой России

    Республика Таджикистан

    Госстрой Республики Таджикистан

    Изменение N 1 принято Межгосударственной научно-технической комиссией по стандартизации, техническому нормированию и сертификации в строительстве (МНТКС) 17.05.2000
    Зарегистрировано МНТКС N 3641
    За принятие изменения проголосовали:

    Наименование государства

    Наименование органа государственного управления строительством

    Республика Армения

    Министерство градостроительства Республики Армения

    Республика Казахстан

    Комитет по делам строительства Министерства энергетики, индустрии и торговли Республики Казахстан

    Кыргызская Республика

    Государственная инспекция по архитектуре и строительству при Правительстве Кыргызской Республики

    Республика Молдова

    Министерство развития территорий, строительства и коммунального хозяйства Республики Молдова

    Российская Федерация

    Госстрой России

    Республика Таджикистан

    Комитет по делам архитектуры и строительства Республики Таджикистан

    Республика Узбекистан

    Государственный Комитет Республики Узбекистан по архитектуре и строительству

    3 ВЗАМЕН ГОСТ 10923-82

    4 ИЗДАНИЕ (ноябрь 2001 г.) с Изменением N 1, утвержденным в августе 2000 г. (ИУС 2-2001)

    1 Область применения

    1 Область применения

    Настоящий стандарт распространяется на рубероид — рулонный кровельный и гидроизоляционный материал, получаемый путем пропитки кровельного картона нефтяными битумами с последующим нанесением на обе стороны полотна покровного состава, состоящего из смеси покровного битума и наполнителя, и посыпки.
    (Измененная редакция, Изм. N 1).

    2 Нормативные ссылки

    В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты и технические условия:

    ГОСТ 12.3.009-76

    Система стандартов безопасности труда. Работы погрузочно-разгрузочные. Общие требования безопасности

    ГОСТ 2678-94

    Материалы рулонные кровельные и гидроизоляционные. Методы испытаний

    ГОСТ 8736-93

    Песок для строительных работ. Технические условия

    ГОСТ 9548-74

    Битумы нефтяные кровельные. Технические условия

    ГОСТ 14192-96

    Маркировка грузов

    ГОСТ 19433-88

    Грузы опасные. Классификация и маркировка

    ГОСТ 21235-75

    Тальк и талькомагнезит молотые. Технические условия

    ГОСТ 30244-94

    Материалы строительные. Методы испытаний на горючесть

    ГОСТ 30402-96

    Материалы строительные. Метод испытания на воспламеняемость

    ГОСТ 30444-97

    Материалы строительные. Метод испытания на распространение пламени

    ГОСТ 30547-97

    Материалы рулонные кровельные и гидроизоляционные. Общие технические условия

    ТУ 21-22-15

    Посыпка крупнозернистая для мягкой кровли

    ТУ 21-27-84

    Посыпка крупнозернистая цветная для рубероида с применением фосфатного связующего

    (Измененная редакция, Изм. N 1).

    3 Основные параметры и размеры

    3.1 В зависимости от марки картона, назначения и вида посыпки рубероид подразделяют на марки, указанные в таблице 1.

    Таблица 1

    Марка рубероида

    Марка картона

    Основное назначение

    Вид посыпки

    РКК-400
    РКК-350

    400
    350

    Для верхнего слоя кровельного ковра

    Крупнозернистая с лицевой стороны и пылевидная или мелкозернистая с нижней стороны полотна

    РКЦ-400

    400

    То же

    Крупнозернистая цветная с лицевой стороны и пылевидная или мелкозернистая с нижней стороны полотна

    РКП-350

    350

    Для верхнего слоя кровельного ковра с защитным слоем и нижних слоев кровельного ковра; для рулонной гидроизоляции строительных конструкций

    Пылевидная или мелкозернистая с обеих сторон полотна, или
    мелкозернистая с лицевой стороны и пылевидная с нижней стороны полотна

    РПП-300

    300

    Для нижних слоев кровельного ковра

    То же

    РПЭ-300

    300

    То же

    «

    Примечание — Допускается вместо пылевидной и мелкозернистой посыпки использовать для защиты нижней или обеих сторон полотна полимерную пленку.

    (Измененная редакция, Изм. N 1).

    3.2 Рубероид выпускают в рулонах шириной 1000, 1025 и 1050 мм. Предельное отклонение по ширине полотна ±5 мм.
    Общая площадь рулона рубероида марок РКК-400, РКЦ-400 и РКК-350 должна быть (10,0±0,5) м, РКП-350 — (15,0±0,5) м, РПП-300 и РПЭ-300 — (20,0±0,5) м.
    Допускается по согласованию с потребителем выпуск рулонов другой ширины и площади.
    Справочная масса рулона рубероида различных марок приведена в приложении А.

    3.3 Условное обозначение рубероида в технической документации и при заказе должно состоять из слова «Рубероид», обозначений марки рубероида и настоящего стандарта.
    Пример условного обозначения рубероида марки РКК-400:

    Рубероид РКК-400 ГОСТ 10923-93

    4 Технические требования

    4.1 Характеристики (свойства)

    4.1.1 Рубероид должен соответствовать требованиям настоящего стандарта и изготовляться по технологическому регламенту, утвержденному предприятием-изготовителем.

    4.1.2 Требования к внешнему виду рубероида, кромкам полотна, слипаемости, ровности торцов, величине выступов на торцах рулона, ширине кромки, количеству составных рулонов и полотен в рулоне — по ГОСТ 30547.
    (Измененная редакция, Изм. N 1).

    4.1.3-4.1.7 (Исключены, Изм. N 1).

    4.1.8 Картонная основа рубероида должна быть пропитана битумом по всей толщине полотна. В разрезе рубероид должен быть черным с коричневым оттенком, без светлых прослоек непропитанного картона.

    4.1.9 Качественные показатели рубероида в зависимости от марки должны соответствовать требованиям, указанным в таблице 2.

    Таблица 2

    Наименование показателя

    Норма для рубероида марок

    РКК-400
    РКЦ-400

    РКК-350

    РКП-350

    РПП-300

    РПЭ-300

    Разрывное усилие при растяжении, Н (кгс), не менее

    333 (34)

    313 (32)

    274 (28)

    216 (22)

    225 (23)

    Масса покровного состава, г/м, не менее

    800

    800

    800

    500

    600

    Водопоглощение в течение 24 ч, %, по массе, не более

    2,0

    2,0

    2,0

    2,0

    2,0

    Потеря посыпки, г/образец, не более

    3,0*/2,0**

    3,0

    * Для марки РКК-400
    ** Для марки РКЦ-400

    4.1.10 Рубероид должен быть гибким. При испытании образца рубероида марки РПЭ-300 на брусе с закруглением радиусом (25,0±0,2) мм при температуре (271±1) К и рубероида всех остальных марок при температуре (278±1) К на лицевой поверхности образца не должно быть трещин.

    4.1.11 Рубероид должен быть теплостойким. При испытании при температуре (353±2) К в течение не менее 2 ч на поверхности образца не должно быть вздутий и следов перемещения покровного слоя.

    4.1.12 Рубероид должен быть водонепроницаемым. При испытании при давлении не менее 0,001 МПа (0,01 кгс/см) в течение не менее 72 ч на поверхности образца не должно быть признаков проникания воды.

    4.1.13 Рубероид РКЦ-400 должен быть цветостойким. При испытании образца в течение не менее 2 ч не должно быть изменения цвета посыпки.

    4.1.14 Требования к сырью и материалам, применяемым для изготовления рубероида, — по ГОСТ 30547.
    Сырье и материалы, применяемые для изготовления рубероида, указаны в приложении Б.
    (Измененная редакция, Изм. N 1).

    4.2 Упаковка и маркировка
    (Измененная редакция, Изм. N 1).

    4.2.1 Упаковку рулонов рубероида производят полосой бумаги шириной не менее 500 мм или картона шириной не менее 300 мм, края которой должны проклеиваться по всей ширине или с двух сторон по всей длине.
    Допускается применение других упаковочных материалов, обеспечивающих сохранность рубероида при транспортировании и хранении.

    4.2.2 Маркировка рубероида должна производиться по ГОСТ 30547. На этикетке (штампе) должны быть указаны:
    — наименование предприятия-изготовителя или его товарный знак;
    — наименование материала и его марка;
    — обозначение настоящего стандарта;
    — номер партии (или другое обозначение партии, принятое на заводе-изготовителе) и дата изготовления;
    — краткая инструкция по применению.
    Перечень данных на этикетке (штампе) может быть дополнен или изменен по согласованию с потребителем продукции.
    Транспортная маркировка — по ГОСТ 14192 с нанесением основных, дополнительных и информационных надписей.

    4.2.1, 4.2.2 (Введены дополнительно, Изм. N 1).

    5 Требования безопасности и охраны окружающей среды

    5.1 Рубероид имеет следующие показатели пожарной опасности:
    — группа горючести — Г4 по ГОСТ 30244;
    — группа воспламеняемости — В3 по ГОСТ 30402;
    — группа распространения пламени — РП4 по ГОСТ 30444.

    5.2 По классификации ГОСТ 19433 рубероид не относится к опасным грузам.

    5.3 Основными видами возможного опасного воздействия на окружающую среду является загрязнение атмосферного воздуха населенных мест, почв и вод в результате неорганизованного сжигания и захоронения отходов рубероида на территории предприятия или вне его, а также свалка его в не предназначенных для этого местах.

    5.4 Отходы, образующиеся при изготовлении рубероида, строительстве и ремонте зданий и сооружений, подлежат утилизации на территории предприятия-изготовителя или вывозу на полигоны промышленных отходов и организованному обезвреживанию в специальных, отведенных для этой цели местах.

    5.5 В случае загорания битума, покровного состава или рубероида следует применять следующие средства пожаротушения: кислотный или пенный огнетушители, асбестовое полотно, кошму, специальные порошки, воду со смачивателем.

    5.6 При погрузочно-разгрузочных работах должны соблюдаться требования безопасности по ГОСТ 12.3.009.
    Раздел 5. (Измененная редакция, Изм. N 1).

    6 Правила приемки

    6.1. Правила приемки рубероида — по ГОСТ 30547.
    Размер партии устанавливают в количестве не более 5000 рулонов.

    6.2. Водонепроницаемость и водопоглощение следует определять не реже одного раза в месяц и при изменении сырьевых компонентов.

    6.1, 6.2 (Измененная редакция, Изм. N 1).

    7 Методы испытаний

    Методы испытаний — по ГОСТ 2678 со следующим дополнением: разрывное усилие при растяжении определяют при скорости перемещения подвижного захвата (50±5) мм/мин.

    8 Транспортирование и хранение

    8.1 Транспортирование рубероида следует производить в крытых транспортных средствах в вертикальном положении не более чем в два ряда по высоте.
    Допускается укладка сверх вертикальных рядов одного ряда в горизонтальном положении.
    По согласованию с потребителем допускаются другие способы транспортирования, обеспечивающие сохранность рубероида.

    8.2 Погрузку в транспортные средства и перевозку рубероида производят в соответствии с Правилами перевозки грузов, действующими на транспорте данного вида.

    8.3 Рулоны рубероида должны храниться рассортированными по маркам в сухом закрытом помещении в вертикальном положении не более чем в два ряда по высоте. Рулоны рубероида могут храниться в контейнерах и на поддонах.
    Срок хранения рубероида — 12 мес со дня изготовления.
    По истечении срока хранения рубероид должен быть проверен на соответствие требованиям настоящего стандарта. В случае соответствия рубероид может быть использован по назначению.
    Разделы 7, 8 (Измененная редакция, Изм. N 1).

    >9 Указания по применению

    Рубероид должен применяться в соответствии с действующими строительными нормами и правилами .

    ПРИЛОЖЕНИЕ А (информационное). Справочная масса рулона рубероида

    ПРИЛОЖЕНИЕ А
    (справочное)

    Марка рубероида

    Справочная масса рулона, кг

    РКК-400

    28

    РКЦ-400

    30

    РКК-350

    27

    РКП-350

    26

    РПП-300

    26

    РПЭ-300

    Отклонение от справочной массы не является браковочным признаком. Справочная масса рассчитана для рубероида с крупнозернистой и пылевидной посыпкой.

    ПРИЛОЖЕНИЕ Б (рекомендуемое). Сырье и материалы, применяемые для изготовления рубероида

    ПРИЛОЖЕНИЕ Б
    (рекомендуемое)

    Битумы нефтяные кровельные по ГОСТ 9548.
    Картон кровельный по действующей технической документации.
    Тальк и талькомагнезит по ГОСТ 21235.
    Посыпка крупнозернистая цветная для рубероида с применением фосфатного связующего по ТУ 21-27-84.
    Посыпка крупнозернистая для мягкой кровли по ТУ 21-22-15.
    Песок для строительных работ по ГОСТ 8736.
    Другое сырье или материалы — по нормативной документации по стандартизации, утвержденной в установленном порядке, в соответствии с технологическим регламентом на производство рубероида.

    ПРИЛОЖЕНИЕ В (информационное). Библиография

    ПРИЛОЖЕНИЕ В
    (справочное)

    СНиП II-26-76 Строительные нормы и правила. Часть 1. Нормы проектирования. Глава 26. Кровли
    СНиП 3.04.01-87 Строительные нормы и правила. Изоляционные и отделочные покрытия

    Толь гидроизоляционный ТГ 350

    Сейчас производится множество покрытий, которые можно использовать для создания слоя гидроизоляции при работах с основанием дома или кровлей, а также других видах. Но наиболее популярным и часто используемым является толь. Его выделяют среди других покрытий особенности, которые и диктуют использование материала.

    Благодаря таким качествам, как огнестойкость, прочность, стойкость к образованию гнили и плесени и доступная цена, материал широко используют в строительстве частных домов и хозяйственных построек.

    Разновидности толя


    Изготавливается толь на картонной основе, которая обработана таким образом, что способна отталкивать влагу. Специального назначения картон смачивается смолой каменного угля с различными добавками, а сверху посыпается минеральной крошкой мелкой или крупной фракции.

    Также существует толь марки ТГ, который не имеет на поверхности никаких дополнительных посыпок и используется как подкладка для проведения других работ и гидроизоляционного или пароизоляционного покрытия. Также его часто применяют для создания первого кровельного слоя.

    Существует несколько разновидностей толя:

    1. С посыпкой, отличающейся крупной фракцией. Покрытие часто используют как второй слой кровельного материала на кровлях с небольшим уклоном или плоских. Поверхность толя полностью усыпана крупнозернистой минеральной посыпкой, а снизу выполняется напыление или мелкозернистая посыпка. Толь с крупнозернистой посыпкой изготавливается под марками ТКК-350 и ТКК-400.
    2. Кровельный толь. Этот материал укладывают на кровлю в качестве нижнего или верхнего слоя. Он имеет мелкозернистую песчаную посыпку с обеих сторон. Выпускаемые марки такого толя ТПК-350, ТПК-400.
    3. Гидроизоляционный толь. Такой вариант материала наиболее дешевый и выпускается без посыпки или с мелкозернистыми компонентами. Наиболее распространенными его разновидностями являются ТКК-350, ТКК-400. Помимо этого, выпускаются такие марки, как ТКП-350, ТОП-500 и ТГ-350К. Данный вид покрытия применяется для выполнения гидроизоляционных работ на фундаменте или кровле.

    Особенности изготовления толя


    Основой толя является кровельный картон, толщина которого составляет от 1 до 1,7 мм с пропиткой натуральной или искусственной смолой от каменного угля. Смола перед пропиткой картона проходит определенную обработку, которая заключается в извлечении из нее влаги. Готовая смола растапливается в специальных контейнерах, через которые пропускаются рулоны картона.

    Смола в таком состоянии имеет температуру в сотню градусов. После того как картон пропитается, лишняя смола убирается с двух сторон специальными валиками, которые имеют диаметр около 15 см. Они вращаются в результате чего лишняя смола снимается, а выходит только почти готовый толь. После этого он посыпается песком с двух сторон, чтобы материал стал более прочным и огнестойким, а также не слипался при нахождении в рулоне.

    Высушиваются обработанные листы при помощи горячего топочного газа и сматываются в бобины, которые оставляются на некоторое время для выстаивания. После готовности материала, он сматывается в рулоны и на них проставляется соответствующая маркировка и вся сопутствующая информация.

    Марка толя ТГ-350 и его характеристики


    Толь гидроизоляционный с такой маркировкой используется для проведения гидроизоляционных работ для стен и фундамента. Выпускается без посыпки и является наиболее дешевым и распространенным материалом для гидроизоляции.

    Важно! Использовать толь ТГ-350 можно даже для обработки подземных участков конструкций.

    Марка толя ТГ-350 имеет все необходимые сертификаты соответствия и по техническим условиям соответствует стандарту ГОСТ 10999-76, по которым данный материал имеет следующее описание – это картон для технических целей, который пропитывается смолой из угля каменного типа или сланца. Выпускается в рулонах для предотвращения залома материала.

    Отличие толя от рубероида и его применение


    Толь используется часто, но все же, большинство работ по гидроизоляции производится с использованием рубероида. Это связано с тем, что рубероид хоть и имеет картонную основу, но пропитывается, как правило, битумом. А такая обработка делает материал более долговечным и прочным.

    Именно поэтому толь применяется там, где важно на время оформить гидроизоляцию с минимальными затратами. Но некоторые свойства толя, например, такие как паронепроницаемость, водостойкость и устойчивость к процессам развития гнили все-таки позволяют использовать материал и для других строительных работ.

    Обычно толь, особенно тот, который имеет крупнозернистую посыпку, используется в качестве чернового материала для временного покрытия кровель. Помимо этого, толь ТГ-350 может быть использован для защиты стен от влаги, а также улучшения эффекта от теплоизоляции.

    Укладывают покрытие в 2 слоя, так как один не сможет выдержать и сезона. Первый слой нужно выполнять на сухую, а последующие уже клеятся при помощи специальной смолы или же битумной мастики. Выполнять первый слой нужно на подготовленную поверхность, на которую заранее укладывается подстилающий слой.

    Рулоны материала хранят в вертикально. Срок их хранения составляет 1 год. По истечении этого времени материал теряет свои качества и технические характеристики и уже не сможет защитить от внешних воздействий в полной мере.

    Профессиональные строители, которые время от времени используют толь, говорят, что часто возникает проблема неполной пропитки материала, в результате чего он надрывается. Если при покупке наблюдаются на видимой части рулона пустые участки, то лучше всего воздержаться от такой покупки, так как материал не соответствует требованиям стандарта и не сможет полноценно выполнять все возложенные на него функции.

    Заключение


    Для создания временной гидроизоляции или чернового покрытия кровли может быть использован толь. Этот материал недорогой и отлично справится с защитой от влаги на некоторое время. Но все же, для более капитальных работ, следует подобрать что-то более основательное с наилучшими качественными характеристиками.

    Что еще почитать по теме?

    ТОЛЬ

    Смотреть что такое «ТОЛЬ» в других словарях:

    • толь — толь, я … Русский орфографический словарь

    • толь — толь/ … Морфемно-орфографический словарь

    • Толь — Толь, Карл Фёдорович Карл Фёдорович Толь нем. Karl Wilhelm von Toll 19 апреля 1777 5 мая 1842 П … Википедия

    • ТОЛЬ — (лат. tholus, от греч. tholos крыша куполом). 1) Листовое железо. 2) Папка для кровель, приготовляемая из шерсти, пропитанной смолой. Словарь иностранных слов, вошедших в состав русского языка. Чудинов А.Н., 1910. ТОЛЬ лат. tholus, от греч.… … Словарь иностранных слов русского языка

    • толь — я, м. tôle диалектная форма слова table стол, доска. 1. Листовое железо. Михельсон 188. 2. Толстый картон, пропитанный каменноугольной смолою, асфальтом или другими водонепроницаемыми и огнеупорными материалами и посыпанный песком; употребляется… … Исторический словарь галлицизмов русского языка

    • толь — ТОЛЬ, диал., прост. – Только – Варнаки! И дела доброго не сделают, а испоганят толь (2. 277). Даль 4. 411: толи, толь «столь, столко» … Словарь трилогии «Государева вотчина»

    • ТОЛЬ — (франц. tole) кровельный и гидроизоляционный материал, получаемый пропиткой кровельного картона каменноугольными или сланцевыми дегтевыми продуктами. Выпускается в рулонах.ТОЛЬ Карл Федорович (1777 1842), генерал от инфантерии (1826), граф (1829) … Большой Энциклопедический словарь

    • ТОЛЬ — 1. ТОЛЬ1, толя, мн. нет, муж. (франц. tôle листовое железо, жесть, от лат. tabula пластина, доска). Непромокаемый толстый картон, пропитанный особым составом, употр. как кровельный и изоляционный материал. Кровельный толь. 2. ТОЛЬ2, нареч.… … Толковый словарь Ушакова

    • ТОЛЬ — ТОЛЬ, я, муж. Пропитанный водонепроницаемым составом картон, употр. как кровельный, изоляционный материал. | прил. толевый, ая, ое. Толковый словарь Ожегова. С.И. Ожегов, Н.Ю. Шведова. 1949 1992 … Толковый словарь Ожегова

    • толь — я; м. . Кровельный материал, изготовленный путём пропитки картона особым водонепроницаемым составом (применяется также как изоляционный строительный материал). Покрыть толем крышу. Обить толем стенки сарая. ◁ Толевый,… … Энциклопедический словарь

    Рубероид

    Рубероид – многослойный материал, получаемый пропиткой кровельного картона легкоплавким битумом и последующего нанесения с обеих сторон слоя тугоплавкого битума, наполненного минеральным порошком. Для пропитки кровельного картона при производстве рубероида используют легкоплавкий кровельный или дорожный битум марки БНК 40/80, 45/80, 45/90 или 60/90. В дальнейшем рубероид покрывают с двух сторон слоем тугоплавкого битума. В результате получается гибкий материал не пропускающий влагу и не поддающийся гниению. Лицевая сторона рубероида покрывается «бронирующей» посыпкой (песком, слюдой, сланцевой мелочью и т.п.), защищающей материал от ультрафиолетового излучения; нижняя сторона – порошком из известняка или талька, для защиты от слипания слоев в рулоне. Длина стандартного рулона рубероида составляет 10 или 20 м. Основными преимуществами рубероида является легкость укладки, гибкость и относительная долговечность по сравнению с толью или пергамином. Вместе с тем, минусами рубероида являются его низкая пожаробезопасность, а также невозможность создания полной гидроизоляции при прямом воздействии воды.

    Маркировка рубероида:

    «К» — кровельный;

    «П» — подкладочный.

    «Р» — рубероид;

    Виды посыпки:

    «К» — крупнозернистая;

    «М» — мелкозернистая;

    «П» — пылевидная;

    «Ч» — чешуйчатая.

    Цифры 300, 330, 350, 400 обозначают плотность картона (г/м 2). Разновидность рубероида:

    Рубемаст – рулонный наплавляемый рубероид , основой для которого служит кровельный картон. Благодаря высокому содержанию вяжущего битума на нижней стороне такой рубероид характеризуется трещиностойкостью и пластичностью, а также долговечностью.

    Стеклорубероид -(стекломаст, стеклоизол) – материал, идентичный рубемасту, но с основой из стеклоткани.

    Еврорубероид — (модифицированный рубероид) изготавливается на стекло волокнистой или синтетической основе, с нанесением покровного слоя (смесь битума и полимерных добавок) 2-5 кг на 1 кв. м.

    Толь – картон, который пропитан сланцевым или каменноугольным продуктом и имеет минеральную посыпку с обеих сторон.

    Вы можете купить рубероид по низким ценам с доставкой в Новосибирске, Бердске, Искитиме, НСО в интернет-магазине Новострой. Подробности уточняйте по тел. 310-75-90 и 310-76-90.

    Что такое рубероид?

    Рубероид является одним из самых распространенных гидроизоляционных материалов для кровли домов. Он подходит для плоских или скатных крыш, фундаментов и цокольных этажей многоэтажных строений. Имеет вид рулонов, шириной около одного метра и длиной до 10 м.п.

    Материалы, из которых производится рубероид, обеспечивают надежное покрытие и защиту крыш от протеканий внутрь помещения.

    Чем отличается толь от рубероида?

    Толь и рубероид – это гидроизоляционные материалы для кровли или фундамента. Не все люди знают, какое между ними различие, и думают, что это одно и то же средство, только называется по-разному. Такое мнение ошибочное, поскольку это разные материалы, хотя выполняют одинаковые функции.

    Отличие между рубероидом и толью в том, что они производятся по разной технологии и с применением различных материалов:

    • Рубероид. Основанием для него служит кровельный картон, который обрабатывается нефтяным битумом (первый слой легкоплавкий, а второй слой тугоплавкий). Поверх образовавшегося покрытия наносят крупнозернистую субстанцию базальтовой посыпкой или тальковой стружкой.
    • Толь. Этот вид покрытия получают путем пропитки кровельного картона каменноугольным или сланцевым дегтем. Верхний шар толи посыпается крошкой из минералов или простым песком.

    Согласно технологии изготовления — толь устарела, и рубероид давно начал вытеснять ее из рынков. Рубероид более качественный и надежный материал. Он прослужит намного дольше, нежели толь. Соответственно, толь намного дешевле за рубероид.

    Пергамин или рубероид — что лучше?

    Современные изоляционные материалы позволяют качественно осуществить гидроизоляцию поверхностей.

    Результатом инновационных разработок есть появление качественных материалов – пергамин и рубероид. Они относятся к материалам для изоляции поверхностей. Реализуются в рулонном виде. Производятся из рулонного картона высокого качества.

    Рубероид создают путем пропитки картона легкоплавким битумом. Верхние слои покрывают тугоплавкими нефтяными битумами, на которые сверху наносятся защитный слой. Он состоит из крошки асбеста, минералов или талька.

    Пергамин не имеет покровного слоя, потому он менее устойчив к механическим повреждениям и биологическим влияниям. Также пергамин может быстро загореться, чего не скажешь о рубероиде. Мастер должен очень аккуратно подходить к укладке пергамина.

    Пергамин не используют как отдельный изоляционный материал. Его применяют в качестве подложки под рубероид. Он имеет отличную теплопроводность, что позволяет лучше сохранять тепло в помещении. Также его используют как пароизоляционный покров крыш и чердаков.

    Для чего нужен рубероид?

    Когда кровля дома имеет плоскую ориентацию, необходимо укладывать гидроизоляционный материал, чтобы защитить крышу от протеканий во время дождей и схода талой воды.

    Также если крыши больших промышленных объектов начинают протекать из-за износа старого покрытия, применяют новую систему гидроизоляционных материалов. Именно таким является рубероид.

    Рубероид — незаменимый материал для гидроизоляции любого строения, которое имеет плоскую или небольшую скатную крышу, уклон которой не превышает 100.

    Универсальность этого материала позволяет использовать его на стенах фундаментных блоков. Он также клеится к фундаменту, как и к плоским поверхностям, обеспечивая надежную защиту дома от попадания внутрь влаги. Этот нюанс не маловажный при строительстве домов на мокрых грунтах.

    Идеально рубероид подходит для покрытия крыш гаражей. Существуют виды рубероида, которые позволят накрыть гараж без единого стыка.

    Также вам будет полезно:

    • Практическая информация о том, как покрыть крышу рубероидом.
    • Технические характеристики рубероида – полезная информация здесь http://urokremonta.ru/ruberoid/tehnicheskie-harakteristiki-ruberoida.html
    • Устройство системы водостока – советы от специалиста

    Рубероид – это самый надежный материал для гидроизоляции крыш и фундаментов домов.

    Также посмотрите полезный видео ролик о ремонте кровли рубероидом

    Чем толь отличается от рубероида?

    Некоторые специалисты толь и рубероид считают стройматериалами, как говорится, одного порядка. Оба материала используются для кровли и гидроизоляции.

    Хотя даже визуально материалы отличаются друг от друга.

    Толь изготавливается из картона, пропитанного каменноугольным маслом, посыпанного тальком. Это наиболее дешевый материал для гидроизоляции. В настоящее время крайне редко применяется для кровельных работ в качестве прокладки. В рулоне 15 кв.м.

    Рубероид различается по составу и технологии производства. Это еврорубероид: картон подвергается пропитке из стекловолокна. При изготовлении рубемаст а картон подвергается пропитке и обработке битумом. Для изготовления стеклорубероида используется не картон, а специальная стеклоткань.

    Рубемаст обычно используется для мягкой кровли, гидроизоляционного материала на фундаментных работах.

    Еврорубероид и стеклорубероид используется для кровли в виде гидроизоляционного и антисептического материала.

    Рубероид обычно стоит почти в два раза дороже толи, в рулоне 10 кв.м.

    ГОСТ 10999-64 Толь кровельный. Технические требования

    Текст ГОСТ 10999-64 Толь кровельный. Технические требования

    >

    Группа Ж14

    ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

    ГОСТ

    10999—64*

    Взамен

    ГОСТ 1886—52,

    ГОСТ 1887—51, ГОСТ 5176—54

    ТОЛЬ КРОВЕЛЬНЫЙ

    Технические требования

    Roofing tar paper. Technical requirements

    Утвержден Государственным комитетом по делам строительства СССР 21/VII 1964 г. Срок введения установлен

    с 1/У11 1967 г.

    Несоблюдение стандарта преследуется по закону

    • 1. Настоящий стандарт распространяется на кровельный толь„ получаемый путем пропитки кровельного картона каменноугольными или сланцевыми дегтевыми продуктами без посыпки или с последующей минеральной посыпкой с одной или двух сторон.

    Кровельный толь применяется в соответствии с главой III-В.12—69 СНиП.

    • 2. Толь выпускается в рулонах шириной полотна 750, 1000

      и 1025 мм.

      Общая площадь рулонов:

      толя с беспокровного (толь-кожа, толь гидроизоляционный) 30±0,5 м2

      толя с песочной посыпкой.«

      18

      песочной

      сторонах по-

      ! верхнего

      посыпкой

      лотна поверх-

      • и нижнего

      постная плен-

      J слоев

      ка пропиточной массы с

      кровли

      последующей посыпкой

      кварцевым песком

      Толь с

      ТВК-350

      На обеих

      Для верх-

      зэо!1!*

      20

      крупнозер-

      сторонах слой

      него слоя

      нистой по-

      более туго-

      кровель-

      сыпкой

      плавких дегтевых продуктов с введенными в них наполни-

      ного ковра

      телями и нанесенной на лицевую поверхность крупнозернистой минеральной посыпкой

      Толь с

      ТВК-420

      На обеих

      Для

      420+“*

      25

      крупнозер-

      сторонах слой

      верхнего

      нистой по-

      более туго-

      слоя кро-

      сыпкой

      плавких дег-

      вельного

      тевых продуктов с введенными в них минеральными наполнителями и нанесенной на лицевую поверхность крупнозернистой мине- i

      ковра

      ральной по- | сыпкой

      ГОСТ 10999—64

      (Измененная редакция — «Информ, указатель стандартов» № 6 1970 г.).

      • 4. Полотно толя не должно иметь трещин, дыр, разрывов и складок.

      • 5. Кромки (края) полотна толя должны быть без надрывов. Примечание. Надрывы длиной не более 3 см в количестве до двух в

      рулоне >не являются браковочным признаком.

      • 6. Рулон толя должен иметь ровные торцы.

      • 7. В разрезе толь должен быть без светлых прослоек непропи-танного картона и без посторонних включений.

      • 8. В одном рулоне допускается соединение не более двух полотен толя. Составных рулонов в партии допускается не более 5%. Края полотен в стыке должны быть ровно обрезаны.

      • 9. Полотно толя в рулоне не должно слипаться, и рулоны должны легко раскатываться без появления трещин при температуре:

      для толь-кожи — от +3 до + 40°С;

      для толя с песочной и крупнозернистой посыпкой — от +10 до +42°С.

      И. Пропиточная и покровная массы для толя должны быть изготовлены из каменноугольных или сланцевых дегтевых продуктов.

      Пропиточная масса не должна содержать летучих веществ, отгоняющихся при температуре до 130°С.

      Применение древесных и торфяных дегтей и пеков не допускается.

      • 12. Поверхность толь-кожи должна быть матовой и не должна иметь -бугорков. Допускаются отдельные блестящие (жирные) пятна, не вызывающие склеивания полотна в рулоне.

      • 13. Поверхность полотна толя с песочной посыпкой с обеих сторон должна быть равномерно и прочно покрыта слоем кварцевого песка. Допускается также применять в качестве посыпки каменные высевки.

      Величина зерен кварцевого песка (или каменных высевок) для посыпки толя должна быть от 0,15 до 2,0 мм.

      Влажность посыпочных материалов должна быть не выше 3,0%.

      Посыпка по крупности зерен подразделяется на три группы: первая — от 0,5 до 1.0 мм;

      вторая — от 1,0 до 2,0 мм; третья — от 2,0 до 3,0 мм.

      Посыпка производится одной из групп зерен, которые втапли-ваются в покровный слой материала. Потеря посыпки при испытании по ГОСТ 2678—65 после двух полных перемещений щетки (тип щетки — кардолента № 16; количество проволок на

      1 см2 — 28) должна быть не более 2 г на образец.

      Нижняя сторона толя должна иметь посыпку из тонкого измельченного минерального вещества.

      • 15. Толь с крупнозернистой посыпкой должен иметь с одного края лицевой поверхности вдоль всего полотна чистую непосыпан-ную кромку шириной не менее 70 мм и не более 100 мм.

      • 16. Содержание наполнителя по отношению к общему весу покровной массы в процентах должно быть не менее:

      пылевидного — 20;

      волокнистого — 10;

      комбинированного — 15.

      • 17. Материал посыпки, а также материалы, применяемые для ее окраски, должны быть стойкими против атмосферных воздействий. Окраска не должна смываться водой.

      • 18. В зависимости от марки толь должен соответствовать требованиям табл. 2.

      Таблица 2

      Показатели

      Толь беспокровный

      Толь с песочной посыпкой

      ■ ■ ■ »

      Толь с крупнозернистой посыпкой

      ТК-350

      ТГ-350

      Т П-350

      ТВК-350

      ТВК-420

      1. Температура размягчения пропиточной массы по методу „Кольцо и шар*4 в °C, не ниже

      34

      45

      34

      28

      28

      2. Отношение веса пропиточной массы к весу абсолютно сухого картона, нс менее

      1,2:1

      1,2:1

      2,1:1

      1,2:1

      1,2:1

      3. Количество покровной массы в г/м2, не менее

      _

      600

      600

      в том числе с нижней стороны, не менее

      100

      юа

      4. Температура размягчения покровной массы по методу „Кольцо и шар44 в °C (без наполнителя), не ниже

      46

      46

      ГОСТ 10999—64

      Продолжение

      Показатели

      Толи беспокровный

      Толь с песочной посыпкой

      Толь с крупнозернистой ПОСЫПКОЙ

      TK-350

      ТГ-350

      ТП-350

      ТВК-350

      | ТВК-420

      5. Потеря в весе при нагреве до 7(УС в течение 5ч в %, не более

      3,5

      3,5

      4

      6. Разрывной груз при растяжении полоски образца толя шириной 50 мм в кг, не менее

      30

      40

      28

      28

      30

      7. Водонепроницаемость:

      под давлением столба, воды высотой 5 см в сутках, не менее

      6

      5

      под давлением

      0,4 ати в мин, не менее

      5

      5

      5

      10

      10

      8. Водопоглощение:

      под вакуумом за 5 мин в % по весу, не более:

      при температуре воды 25°С

      25

      20

      при температуре воды 35°С

      24

      при атмосферном давлении через 24 ч в % по весу, ле более

      25

      12

      12

      9. Остаточная прочность после 24-часового водопо-глошеиия в % к разрывному грузу (прочность) в воздушно-сухом состоянии, не менее

      50

      (Измененная редакция — «Информ, указатель стандартов» № 6 1970 г.).

      • 19. Толь всех марок должен быть гибким. При изгибании полоски толь-кожи на стержне диаметром 10 мм при температуре 20±2°С не должно появляться трещин; при изгибании полоски толя с песочной посыпкой на стержне диаметром 20 мм, а также при изгибании полоски толя с крупнозернистой посыпкой на стержне

      диаметром 30 мм при температуре 20±2°С не должно появляться трещин и участков с непосыпанным покровным слоем в результате отслаивания посыпочного материала.

      • 20. Толь с крупнозернистой посыпкой должен быть температуроустойчивым. При нагревании в вертикальном положении в течение 2 ч при температуре 45°С не должно быть сползания посыпки, вздутий и других дефектов покровного слоя.

      • 21. Толь должен быть принят техническим контролем предприятия-изготовителя. Изготовитель должен гарантировать соответствие выпускаемого толя требованиям настоящего стандарта.

      • 22. Отбор образцов и методы испытаний толя должны соответствовать указанным в ГОСТ 2678—65.

      • 23. Упаковка, маркировка, хранение и транспортирование толя должны производиться по ГОСТ 2551—64.

      Замена

      ГОСТ 2678—66 введен взамен ГОСТ 2678—53.

      243

      Что такое толь? Технические характеристики и применение.

      Обширный ассортимент кровельных и гидроизоляционных рулонных материалов содержит много наименований. Одним из самых старых и наиболее известных является толь.

      Это материал, который представляет собой специальный сорт картона, дважды обработанный каменноугольной или дегтевой пропиткой. Выпускается в нескольких вариациях. Различные марки и сорта имеют свое предназначение. Одни служат для обустройства кровель, другие используются для защиты строительных конструкций от проникновения влаги.

      Дегтевая пропитка, содержащая в своем составе значительное количество карболовой кислоты, способствует предотвращению гнилостных процессов. Не допускает размножения бактерий и развития сырости.

      Основные технические характеристики материала

      При покупке кровельного материала данной категории следует обращать внимание на маркировку. Его качество должно соответствовать требованиям ГОСТ 10999-76 «Толь кровельный. Технические требования». Определить какие-либо специальные преимущества толи непросто. Разве что можно отметить невысокую стоимость, отсутствие дефицита на рынке, неприхотливость в работе. Застройщиков особенно привлекает дешевизна материала. Поскольку его приходится часто использовать при временных работах.

      Технические характеристики толя по маркам изложены в следующей таблице:

      Марка Наименование Наличие верхнего слоя Предназначение Вес 1 кв.м картона, г

      ТК 350

      Толь-кожа (без посыпки)

      нет

      Кровля, пароизоляция

      350

      ТГ 350

      Толь гидроизоляционный

      нет

      Гидроизоляция

      350

      ТП 350

      Толь с посыпкой из песка

      По обеим сторонам полотно имеет поверхностную пленку из пропиточного вещества, защищенную слоем кварцевого песка

      Кровля для временных зданий и сооружений или первый слой для рулонной кровли из других материалов

      350

      ТВК 420

      Толь с посыпкой материалом с крупным зерном

      По обеим сторонам слои тугоплавкого дегтя с крупнозернистой посыпкой

      Кровля для временных зданий и сооружений или первый слой для рулонной кровли

      420

       

      Существуют еще марки толя с крупнозернистой посыпкой с лицевой стороны полотна – ТГ 300 и ТКК 400. Изнаночная часть у них обработана мелкозернистым или пылевидным порошком. Посыпка не должна содержать глинистые примеси.

      Из недостатков материала можно отметить его слабую стойкость к огню, плохую переносимость минусовых температур. На морозе толь трещит и лопается. Долговечностью он также порадовать не может.

      Как сделать кровлю

      Решение покрыть крышу толью обычно принимается в качестве временной меры. Чтобы толевая кровля прослужила, как минимум, три года, необходимо правильно выполнить все этапы работы. Укладку можно производить на любое основание – деревянное, бетонное, шлакобетонное. Однако материал применим только для плоских крыш, с уклоном не более 12 градусов. Для работы необходимо выбрать теплое, сухое время года.

      1. Если покрытие выполняется повторно, то старое надо снять полностью, а основу очистить и выровнять. В случае стропильной конструкции крыши делают новую обрешетку или правят имеющуюся. При наличии основания из железобетонных плит – выполняется выравнивающая стяжка цементно-песчаным раствором.
      2. Для нижних слоев кровли используется толь-кожа ТК 350 или марка ТП 350 с мелкой посыпкой. Верхнее покрытие выполняется толью для крыши ТВК 420 с крупнозернистой лицевой поверхностью.
      3. Крепление к основанию и полотен между собой осуществляется дегтевой мастикой или специальной толевой клебемассой.
      4. Рулон толя необходимо развернуть и разрезать на куски нужной длины с тем расчетом, что монтаж будет производится вдоль ската крыши.
      5. В случае применения толя с мелкой посыпкой для первого слоя, посыпку с изнаночной стороны лучше удалить жесткой щеткой или деревянным шпателем. С лицевой стороны ее убирают только на ширину нахлеста – 8-10 см.
      6. Мастику следует разогреть и нанести на полотно. Средний расход составляет 2 кг на 1 м2 площади.
      7. Лист толя укладывают на обрешетку и плотно прижимают к ней, стараясь хорошенько разгладить. Следующий лист кладут на предыдущий с напуском в пределах 10 см.
      8. Края полотен необходимо дополнительно обработать мастикой и тщательно придавливают к обрешетке, чтобы не допустить появления пузырей.
      9. Затем поверх толя прибивают деревянные бруски квадратного или треугольного сечения размером 50*50 мм. Промежуток между брусками делают меньше ширины толевого полотна на 100 мм.
      10. Следующий пласт кровельного покрытия укладывают таким образом, чтобы края полотен ложились на бруски. К ним крепление осуществляется толевыми гвоздями.
      11. На каждом бруске получается стык двух полотен. Его дополнительно закрывают полосками толя, свернутыми пополам, и прибивают теми же гвоздями с расстоянием в 50-60 мм.
      12. На карнизах и спусках толь надо подвернуть под обрешетку и закрепить гвоздиками. Конек оформляется досками, обработанными антисептиком и антипиреном.

      В случае бетонного основания толевая кровля укладывается на дегтевую мастику по принципу рубероидного покрытия. Кстати, чем отличается толь от рубероида? Основное отличие состоит в пропитке. В производстве рубероида используется битум, а толь делают при помощи дегтя. Рубероид дороже и долговечнее толя. Однако второй обладает большей стойкостью к гниению и проникновению влаги. Поэтому, что лучше приобретать, толь или рубероид решается в каждом конкретном случае зависимо от цели использования.

      Применение толя в качестве гидроизоляции

      Чтобы изолируемая поверхность была надежно защищена от проникновения влаги, ее следует тщательно очистить от грязи, пыли, мусора. Наплывы раствора надо сбить, раковины и другие неровности заделать раствором. Для устройства гидроизоляции, горизонтальной или оклеечной, используют различные разновидности толя. Но чаще всего отдают предпочтение толю марки ТГ 350, не имеющего посыпки.

      При защите от влаги горизонтальных поверхностей, на подготовленную основу наносят слой дегтевой мастики, и по ней расстилают толь. Затем первый пласт сверху смазывают горячей мастикой и наклеивают следующий слой гидроизоляции.

      Толь применяют для гидроизоляции не только горизонтальных, но также вертикальных поверхностей. Очищенные конструкции (обязательно в сухом состоянии) покрывают мастикой, на которую наклеиваются полотна толя. Нахлест одного листа на другой должен быть порядка 100-150 мм. Оклеечную изоляцию необходимо плотно соединять с горизонтальной и верхнюю поверхность хорошенько промазать мастикой, чтобы у влаги из грунта не было ни малейшей возможности проникнуть к изолируемым конструкциям.

      Толь кровельный и гидроизоляционный — Справочник


       

      Многие путают толь с рубероидом. Да, внешний вид, особенно в рулонах, очень похож. Применение тоже аналогично. Но между ними есть существенная разница: рубероид ― это кровельный картон, пропитанный битумом; толь ― это кровельный картон, пропитанный дёгтем. Когда  придумали пропитывать картон каменноугольной смолой (дёгтем), углехимики вздохнули с облегчением ― до этого смола не находила применения.

       

      Производство толя

      Для его получения кровельный картон пропускается через ванну, в которую подаётся дёгтевый или дегтепековый состав (в зависимости от марки толя). Далее идёт слабое отжатие и посыпка. Вот на этом этапе у разных марок толя процесс происходит по-разному. У толя с посыпкой мелким песком посыпка производится с обеих сторон. Беспокровный толь ничем не посыпается.

      Толь с крупнозернистой посыпкой после пропитки и обжимки покрывается ещё слоем тугоплавкой дёгтевой смеси с минеральными наполнителями. Потом на лицевую сторону подаётся крупнозернистая посыпка, изготовленная из раздробленных горных пород. Эта посыпка может быть окрашена несмываемыми красками. После посыпки толь сворачивается в рулоны.

      Используется толь как кровельный, подкладочный под другие кровли, пароизоляционный материал. Как и рубероид, кладётся в качестве прокладки между фундаментом деревянным срубом.

       

      Виды и маркировка толя

      Толь с мелкопесчаной посыпкой выпускается двух марок: ТКП-400 и ТКП-350. Температурная граница размягчения около 40°С, площадь «трубки» ― 15 м2.

      Толь с защитной крупнозернистой присыпкой также идёт в двух марках: ТКК-400 и ТКК-350. Размягчается при 26 — 28°С, имеет площадь 10 м2.

      Беспокровный толь бывает аж четырёх марок:  ТК-200, ТК- 250, ТК-300 и ТК-350. Площадь такого рулона 30 м2.

      Первая буква «Т» в маркировке означает толь, вторая «К» ― кровельный, третья «П» ―песчаная присыпка, а если «К» ― крупнозернистая. Числовое значение, как и рубероида, означает вес одного квадратного метра картонной основы, выраженного в граммах.

      Толь гидроизоляционный ТГ-300 и ТГ-350 обладает защитным слоем из минеральной посыпки (мелкозернистой). Отличается от кровельного более высокими значениями температуры размягчения своей пропиточной массы.

       

      Толь или рубероид?

          Если они нужны именно для верхнего покрытия на кровле, то, конечно, лучше выбрать рубероид, он будет прочнее и долговечнее. А вот как подкладочный материал под другие кровельные покрытия практичнее будет толь. Он не пропускает воду и является отличным пароизолятором, при этом легче и дешевле.

          Зачем нужен был толь, если есть рубероид? Во-первых, толь был придуман на пару веков раньше рубероида. Во-вторых, куда девать такой побочный продукт переработки углей и сланцев, как дёготь? Телег почти не осталось, для сапог есть более пахучие пропитки, в медицине используется мизерное количество. А для недолговечных и временных построек такой материал ― само то.

      Еще о гидроизоляционных материалах:

       — Гидроизол

       — Бризол

       — Изол

       — Натриевое жидкое стекло

       — Пергамин кровельный

       — Полиэтилен

       — Полиэтиленовые листы с анкерными ребрами

       — Фольгоизол

       — Рубероид

       — Стеклорубероид


      загрузка…

      ГОСТ 10999-64 «Толь кровельный. Технические требования»

      ГОСТ 10999-64

      (Измененная редакция — «Информ. указатель стандартов» Ко 6 1970 г.).

      4.    Полотно толя не должно иметь трещин, дыр, разрывов и складок.

      5.    Кромки (края) полотна толя должны быть без надрывов.

      Примечание. Надрывы длиной не более 3 см в количестве до двух в

      рулоне «е являются браковочным признаком.

      6.    Рулон толя должен иметь ровные торцы.

      7.    В разрезе толь должен быть без светлых прослоек непропи-танного картона и без посторонних включений.

      8.    В одном рулоне допускается соединение не более двух полотен толя. Составных рулонов в партии допускается не более 5%. Края полотен в стыке должны быть ровно обрезаны.

      9.    Полотно толя в рулоне не должно слипаться, и рулоны должны легко раскатываться без появления трещин при температуре:

      для толь-кожи — от +3 до -М0°С;

      для толя с песочной и крупнозернистой посыпкой — от +10 до +42°С.

      10.    Картон для толя должен удовлетворять требованиям ГОСТ 3135—64.

      И. Пропиточная и покровная массы для толя должны быть изготовлены из каменноугольных или сланцевых дегтевых продуктов.

      Пропиточная масса не должна содержать летучих веществ, отгоняющихся при температуре до 130°С.

      Применение древесных и торфяных дегтей и пеков не допускается.

      12.    Поверхность толь-кожи должна быть матовой и не должна иметь бугорков. Допускаются отдельные блестящие (жирные) пятна, не вызывающие склеивания полотна в рулоне.

      13.    Поверхность полотна толя с песочной посыпкой с обеих сторон должна быть равномерно и прочно покрыта слоем кварцевого песка. Допускается также применять в качестве посыпки каменные высевки.

      Величина зерен кварцевого песка (или каменных высевок) для посыпки толя должна быть от 0,15 до 2,0 мм.

      Влажность посыпочных материалов должна быть не выше 3,0%.

      14.    Поверхность толя с крупнозернистой посыпкой с лицевой стороны должна быть покрыта равномерно и без просветов сплошным слоем минеральной посыпки.

      Посыпка по крупности зерен подразделяется на три группы:

      первая — от 0,5 до 1.0 мм;

      вторая — от 1,0 до 2,0 мм;

      третья — от 2,0 до 3,0 мм.

      240

      Карта Toll-рецепторов лежит в основе структурной пластичности мозга

      [Примечание редакции: авторы повторно представили исправленную версию статьи на рассмотрение. Ниже приводится ответ авторов на первый раунд проверки.]

      Рецензент № 1:

      Это интересная рукопись о роли рецепторов Toll в установлении структурной пластичности мозга, выполненная группой, которая внесла плодотворный вклад в характеристику биологии рецепторов членов семейства Toll.Предпосылки и цели великолепно представлены во Введении. Затем в рукописи представлен впечатляющий объем данных, касающихся вклада рецепторов Toll в структурную пластичность мозга у мух. Модель, представленная авторами, привлекательна, но не совсем убедительна, в частности, потому, что многие из используемых инструментов не проходят валидацию и отсутствуют элементы управления. Ниже приведены мои основные комментарии:

      1) Подраздел «Карта рецепторов Toll в мозге Drosophila », последний абзац: ссылка на используемое антитело против Toll-1 и подтверждение его специфичности отсутствуют.

      Anti-Toll-1 уже был одобрен другими. Это коммерческое антитело от Santa Cruz Biotechnology (sc-33741): Toll (d-300). Это было ранее подтверждено Khadilkar et al., 2017, и Lund, De Lotto and De Lotto, 2010. Мы добавили эти ссылки в подраздел «Карта рецепторов Toll в мозге Drosophila ».

      2) Подраздел «Toll-2 оказывает нейропротекторное действие в мозгу через MyD88», второй абзац: каковы доказательства того, что Myd88 [NP6394] достоверно сообщает о экспрессии MyD88?

      MyD88 [NP6394] представляет собой вставку P-элемента GAL4 чуть более чем на 500 п.н. выше стартового кодона MyD88 и, что важно, в пределах одного экзона 5 ’UTR (см. Www.flybase.org). Таким образом, поскольку вставка GAL4 находится внутри неинтронной мРНК, она обязательно представляет собой паттерн эндогенной экспрессии. Тем не менее, чтобы учесть озабоченность рецензента, мы также попробовали: (1) окрашивание довольно старой и крошечной аликвотой антител против MyD88, которую мы имели. К сожалению, это не дало надежного результата. (2) Мы создали линию GFP-MyD88 CRISPR и протестировали ее на мозге взрослого человека. К сожалению, это не дало надежного сигнала GFP, поскольку мы допустили ошибку в молекулярном дизайне.(3) Мы купили и протестировали линию трансгенома MyD88fTG Fosmid (Sarov et al., 2016 eLife ), которая должна была экспрессировать слитый белок MyD88-GFP в контексте эндогенных регуляторных последовательностей. Однако это не выявило никакого сигнала, и авторы предупредили, что не все их фосмиды успешны. В заключение, много усилий и денег было потрачено на решение этого вопроса, в то время как вставка NP6394-GAL4, скорее всего, обеспечивает точный профиль экспрессии MyD88 .Мы добавили объяснение того, почему MyD88 [NP6394] подходит для использования в подразделе «Toll-2 — нейрозащитный механизм в головном мозге».

      3) Подраздел «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге через MyD88», пятый абзац: тот факт, что потеря функции Toll-2 в MyD88-позитивных клетках вызвала потерю клеток, не означает, что Toll-2 поддерживает выживание нейронов посредством канонический путь MyD88: это только один из возможных способов объяснить результаты.

      Мы уже опубликовали исчерпывающий механистический анализ, демонстрирующий, что рецепторы Toll способствуют выживанию клеток через MyD88 и гибели клеток через Sarm (Foldi et al., 2017, «Одна из 10 лучших статей 2017 года»). Более того, это эволюционно консервативно, поскольку у млекопитающих MyD88 способствует выживанию клеток и гибели клеток Sarm (Kim et al., 2007; Mukherjee et al., 2015). Таким образом, мы подумали, что здесь нет необходимости предоставлять доказательства того же типа или предоставлять биохимические доказательства того, что Toll-2 связывает MyD88 и передает сигналы через MyD88, как мы уже сделали это для Toll-6 и -7 (Foldi et al. al., 2017), а MyD88 — самый известный адаптер из всех платных и TLR. Наши данные согласуются с регуляцией выживаемости клеток с помощью Toll-2 через MyD88.На тот случай, если рецензент пропустил эту литературу, мы добавили разделы, поясняющие это, во Введении, Результатах и ​​Обсуждении.

      Мы показали, что потеря функции Toll-2 вызвала нейродегенерацию: она вызвала потерю нейронов (представлены на рис. 2G, H и рис. 3C-I), уменьшила выживаемость и продолжительность жизни мух (представленная на рис. 3 — рис. поведение (анализ лазанья и арена Буридана, представленный рисунок 3 — рисунок в приложении 1C и рисунок 3J-N) и вызвало дегенерацию нейритов и целых нейропилов (рисунок 3C-I).

      Тем не менее, чтобы ответить на озабоченность рецензента и напрямую спросить, может ли Toll-2 регулировать выживание или гибель клеток, мы проверили, вызывает ли нокдаун Toll-2 в клетках MyD88 + апоптоз. Мы окрасили мозги MyD88GAL4> UASToll-2RNAi с помощью маркера апоптоза анти-Dcp1 и автоматически подсчитали клетки Dcp1 + в 3D по всему стеку (то есть не в проекциях) с помощью специально разработанного программного обеспечения DeadEasy. Апоптотические клетки удаляются очень быстро, и поэтому их легко пропустить.Поэтому мы протестировали куколку 1-го дня, когда большая часть гибели клеток происходит в нормальном мозге, а нейроны имеют большую потребность в поддержании жизни. Мы подсчитали апоптозные клетки в центральном мозге, так как в зрительных долях происходит так много гибели клеток, что DeadEasy не может точно подсчитать. Нокдаун Toll-2 в клетках MDy88 и ( MyD88GAL4> UASToll-2RNAi ) усиливал апоптоз в центральном мозге. Предыдущие данные показали, что нокдаун Toll-2 RNAi вызывал потерю клеток MyD88 +, и теперь мы также показываем, что нокдаун MyD88 RNAi также вызывает потерю клеток MyD88 + (новый рисунок 2H).Вместе эти данные демонстрируют, что Toll-2 требуется для поддержания выживания клеток, экспрессирующих MyD88 .

      Эти новые данные теперь представлены на новом рисунке 2G, H. Мы также переписали текст, чтобы интерпретация точно отражала данные — подраздел «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      4) Подраздел «Toll-2 оказывает нейропротекторное действие в головном мозге через MyD88», шестой абзац: фенотип мух MyD88 KO или KD следует сравнить с фенотипом мутантов Toll-2.

      Мы уже опубликовали, что потеря функции MyD88 у мутантов вызывает апоптоз и потерю нейронов в вентральном нервном канатике куколки (Foldi et al., 2017). Тем не менее, чтобы ответить на запрос рецензента, мы проверили, может ли MyD88-RNAi в нейронах, экспрессирующих MyD88 , вызывать потерю нейронов в мозгу куколки и взрослого человека ( MyD88GAL4 x UAShistoneYFP, UASMyD88RNAi ) для сравнения с Данные Toll-2RNAi на рисунке 2H.Мы обнаружили, что MyD88-RNAi в куколке вызывает потерю клеток в центральном мозге, демонстрируя, что поддержание выживания нейронов с помощью Toll-2 требует MyD88. К взрослой стадии эффект нокдауна MyD88 был восстановлен, что позволяет предположить, что MyD88 также участвует в пролиферации клеток, что является предметом второй части статьи.

      Эти новые данные теперь представлены на Рисунке 2H, а также изменения в тексте в подразделе «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      5) Подраздел «Toll-2 может увеличивать количество клеток в развитии и во взрослом мозге», первый абзац: корреляция не является причиной, авторы не могут сделать вывод, что Toll-2 поддерживает выживание нейронов в центральном мозге через канонический путь MyD88 из этих эксперименты.

      Это критика, аналогичная критике в пункте (3). Чтобы ответить на критику этого рецензента и улучшить данные, а также интерпретацию, мы: (1) проверили, увеличивает ли потеря функции Toll-2 в клетках MyD88 + количество апоптотических клеток в центральном мозге куколки, окрашенных антибиотиками. -Dcp1. И мы обнаружили, что это так. (2) Показано, что нокдаун MyD88 RNAi приводит к потере клеток в кукольном мозге. (3) Удален дополнительный рисунок 4, который теперь является избыточным, поскольку приведенные выше данные прямо демонстрируют, что Toll-2 и MyD88 поддерживают выживание нейронов в куколке.Эти новые данные теперь представлены на новых рисунках 2G, H и изменениях текста в подразделе «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      6) Подраздел «Передача сигналов Toll активна в мозге куколки и взрослого человека», заголовок: утверждение вводит в заблуждение, данные представляют только данные экспрессии для компонентов пути или для репортеров, которые не являются исключительными для передачи сигналов Toll.

      Теперь это было изменено на «Известные эффекторы передачи сигналов Toll распределяются в мозге развивающегося и взрослого человека».

      7) Подраздел «Дорожная сигнализация активна в мозге куколки и взрослого», пятый абзац: утверждения относительно дорсального и дифференциального крайне сбивают с толку.Что означает «ядерный диф и спинной»? Имеются в виду авторы коротких изоформ транскриптов, кодирующих белки с NLS?

      Различные изоформы Dorsal и Dif описаны в Zhou et al., 2015. Изоформы A, B, D, E и изоформы C, F в Flybase соответствуют изоформам A и B, соответственно, из Zhou et al., 2015. Здесь авторы описали изоформы Dorsal-A и Dif-A, которые содержат домен Rel-гомологии, узнавание сайта kB в ядре и сигнал ядерной локализации (NLS) на C-конце, тогда как Dorsal-B и Dif-B не имеют NLS.Цитоплазматические изоформы B действуют в NMJ, рекрутируя рецепторы Glu (Heckscher et al. 2007 Neuron). Поскольку мы ранее показали, что поддержание выживания нейронов с помощью Tolls зависит от ядерной транслокации Dif и Dorsal (Foldi et al., 2017), чтобы функционировать как факторы транскрипции, управляющие экспрессией генов, мы были заинтересованы в визуализации локализации только ядерные изоформы. Спасибо за обратную связь, мы добавили краткое объяснение этого момента в подраздел «Известные эффекторы передачи сигналов Toll распределяются в развивающемся и взрослом мозге».

      8) Подраздел «Передача сигналов Toll активна в мозге куколки и взрослого человека», пятый абзац: эксперименты с использованием трансгенных мух с помеченными Dif и Dorsal. Известно, что белки NF-κB беспорядочно связываются с сайтами связывания Rel, поэтому после эктопической экспрессии Dif и Dorsal можно ожидать потери специфичности, и ее следует принимать во внимание при интерпретации результатов.

      Позвольте нам уточнить, поскольку может показаться, что рецензент упустил суть здесь.Действительно, трансгенные конструкции переносятся в Bacmids, поэтому меченые белки экспрессируются на уровнях дикого типа. Однако мы не исследовали фенотипические последствия их изменения уровней на транскрипцию с сайтов связывания NFkB на ДНК. Вместо этого мы только спросили, могут ли меченые белки попасть в ядро, для каких уровней или специфичности связывания как факторов транскрипции, в этом контексте, не имеет значения.

      9) Подраздел «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозгу куколки и взрослого человека через Wek», первый абзац: я не вижу данных на рисунках, показывающих присутствие дорсального и Dif в ядре куколочного и взрослого мозга.

      Похоже, что рецензент 1 пропустил эти данные. Эти данные представлены на представленном Рисунке 4 — приложении к рисунку 1I-L, на котором показаны круглые клетки GFP +, выявляющие ядерные изоформы Dorsal и Dif в кукольном мозге (Рисунок 4 — приложение к рисунку 1I, K), а также ядерное Dif также во взрослом мозге ( Рисунок 4 — приложение к рисунку 1J). Также были предоставлены изображения с большим увеличением (справа от всего мозга), показывающие отчетливый круглый ядерный сигнал.

      10) Рисунок 4E: трудно интерпретировать результаты этого эксперимента, не зная фенотипа, который может возникнуть в результате однократного лечения (т.е.е. Только KD JNK, только кактус, только OE PI3K).

      Мы выполнили эти однострочные тесты для UAS-JNK-RNAi, UAS-cactus-RNAi и UAS-PI3KCAAX . Даже если они не были запрошены, мы также добавили только UAS-wek и UAS-MyD88RNAi для завершения. Мы не делали этого для клеток Kenyon, так как они все равно не подвергались значительному влиянию комбинированных генотипов. Эти новые данные теперь представлены на рисунке 4E.

      11) Обсуждение, вероятно, слишком длинное и недостаточно целенаправленное.

      Нет проблем, мы сократили его по сравнению с предыдущей версией. Однако с огромным увеличением данных после пересмотра это оказалось сложной задачей. Тем не менее, мы приложили значительные усилия, чтобы сохранить всю рукопись как можно более краткой.

      12) Условные обозначения к рисункам слишком короткие, часто их трудно понять неспециалистам.

      Нет проблем, мы их удлинили.Мы благодарим этого рецензента за его / ее положительную и восторженную оценку нашей работы, а также за очень полезные предложения, которые улучшили нашу рукопись.

      Рецензент № 2:

      […] В целом это довольно описательное исследование. На протяжении всей статьи автор часто делает выводы, не подтверждаемые фактическими данными. Плохое написание рукописи затрудняет логическое развитие статьи. Здесь я просто выделю несколько очевидных вопросов, касающихся строгости исследований (но в статье их гораздо больше).

      Мы благодарны рецензенту 2 за отзывы и конструктивную критику, которые помогли нам улучшить рукопись.

      Мы уважительно не согласны с этим рецензентом, что эта работа «в целом довольно описательная», поскольку из семи очень больших цифр и пяти дополнительных цифр, которые были представлены, большая часть данных относится к функциональному генетическому анализу (например, клеточные и поведенческие фенотипы потери и увеличения функциональных состояний и генетические тесты на эпистаз), а не описания.Мы ценим поднятые обоснованные вопросы, которые мы рассмотрели следующим образом:

      1) В разделе результатов под названием «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в мозге через MyD88» авторы заявили, что «поскольку MyD88 является адаптером Tolls, и он необходим для обеспечения выживания нейронов в других контекстах (Foldi, et al., 2017; Kim, et al., 2007), тот факт, что потеря функции Toll-2 в клетках MyD88 + вызывает потерю клеток, означает, что Toll-2 поддерживает выживание нейронов посредством канонического пути MyD88.«Простая демонстрация того, что отключение Toll-2 уменьшило количество ячеек MyD88 +, не оправдывает это утверждение. Как можно сделать вывод о вовлечении MyD88 без фактического воздействия на активность MyD88?

      Мы уже опубликовали исчерпывающий механистический анализ того, как рецепторы Toll регулируют выживание клеток с помощью MyD88 и гибель клеток с помощью Sarm (Foldi et al., 2017, выбранный JCB как «Одна из 10 лучших статей 2017 года» и для Специальной коллекции на Cellular Neurobiology 2018 »как« одно из самых захватывающих открытий в клеточной нейробиологии »).Таким образом, мы подумали, что здесь нет необходимости предоставлять доказательства того же типа, и мы не считаем необходимым предоставлять биохимические доказательства того, что Toll-2 связывает MyD88 и передает сигналы через MyD88, как мы уже сделали это для Toll-6. и -7 (Foldi et al., 2017), и все дорожные сборы могут это сделать. Мы также уже опубликовали, что потеря функции MyD88 у мутантов вызывает апоптоз, поскольку это увеличивает частоту апоптотических клеток Dcp1 + и потерю нейронов в вентральном нервном канатике куколки (Foldi et al., 2017).

      Тем не менее, чтобы ответить на запрос рецензента, мы изменили активность MyD88, как было предложено. Мы проверили, влияет ли MyD88-RNAi в нейронах, экспрессирующих MyD88, количество нейронов ( MyD88GAL4 x UAShistoneYFP, UASMyD88RNAi ) для сравнения с данными Toll-2RNAi на рисунке 2H. Мы обнаружили, что MyD88-RNAi в куколке вызывает потерю клеток в центральном мозге. К взрослой стадии эффект нокдауна MyD88 был восстановлен, что позволяет предположить, что MyD88 также участвует в пролиферации 5 клеток, что является предметом второй части статьи.Эти данные демонстрируют, что MyD88 необходим для поддержания выживания клеток в кукольном мозге. Эти новые данные представлены на Рисунке 2H и изменениях текста в подразделе «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      Чтобы предоставить дополнительные доказательства, которые решают опасения рецензента 2, мы также проверили, вызывает ли потеря функции Toll-2 в клетках MyD88 + апоптоз, который приведет к потере клеток. Мы окрашивали мозги MyD88GAL4xUASToll-2RNAi апоптотическим маркером анти-Dcp1 с последующим автоматическим подсчетом клеток в 3D по всем стопкам конфокальных изображений (т.е.е. не в проекциях) с помощью программного обеспечения DeadEasy, которое мы разработали. Апоптотические клетки удаляются очень быстро (например, в течение 20 минут), и поэтому их легко пропустить. Поэтому мы протестировали куколку первого дня, так как это момент времени, когда большая часть гибели клеток происходит в нормальном мозге, и нейроны имеют большую потребность в поддержании жизни. Мы подсчитали апоптозные клетки в центральном мозге, так как в зрительных долях происходит так много гибели клеток, что DeadEasy не может точно подсчитать. Мы обнаружили, что нокдаун Toll-2 в клетках MDy88 ( MyD88GAL4> UASToll-2RNAi ) вызывал усиление апоптоза в центральном мозге.Это демонстрирует, что Toll-2 необходим для поддержания выживания клеток, экспрессирующих MyD88. Эти новые данные теперь представлены на новом рисунке 2G.

      Мы также переписали текст, чтобы интерпретация точно отражала данные — подраздел «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      2) В разделе результатов, озаглавленном «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозгу куколки и взрослого человека через Wek», фактические данные, подтверждающие это утверждение, были очень слабыми. Простого наблюдения, что сверхэкспрессия Wek вместе с MyD88 RNAi увеличивает количество клеток в центральном мозге, недостаточно, чтобы сделать такой вывод.Как можно сделать такой вывод, фактически не изучая требования Wek?

      Мы согласны с тем, что лучше всего тестировать также только Wek, а также только MyD88-RNAi. Таким образом, в ответ на этот рецензент мы протестировали:

      1) изменяет ли условная сверхэкспрессия одного wek только взрослым людям количество клеток ( MyD88GAL4 UAShisYFP, tubGAL80ts x UAS wek ). Мы показываем на новом рисунке 4E, что количество ячеек увеличилось по сравнению с элементами управления.

      2) влияет ли условный нокдаун MyD88 только на взрослых людей на количество клеток ( MyD88GAL4 UAShisYFP, tubGAL80ts x UAS MyD88RNAi ) во взрослом мозге.Мы показываем на новом рисунке 4E, что количество ячеек увеличилось по сравнению с элементами управления.

      Мы тестировали только центральный мозг, а не KC, так как не было обнаружено значительного влияния на KC с комбинированными линиями. В целом, наши данные показывают, что как условное отключение MyD88 , так и сверхэкспрессия wek во взрослом мозге увеличивают количество клеток в мозге, и что оба вместе приводят к синергическому, дальнейшему увеличению количества клеток во взрослом мозге. Это согласуется с тем, что MyD88 способствует покою, а Wek индуцирует пролиферацию, противодействуя MyD88.

      Эти новые данные теперь представлены на рисунке 4E и в подразделе «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозге куколки и взрослого человека».

      Мы также использовали эпистаз, чтобы проверить, спасает ли wek-knockdown увеличение числа клеток, вызванное сверхэкспрессией Toll-2, и это действительно так. Эти новые данные представлены на Рисунке 7F и в подразделе «Toll-2 способствует клеточному циклу в мозгу через Йорки».

      3) Это исследование опирается на одну линию РНКи для изучения функции различных Toll-подобных рецепторов.По крайней мере, еще одна линия РНКи должна быть протестирована, чтобы исключить возможность нецелевых эффектов.

      Мы использовали линию UAS-Toll-2-RNAi из центра запасов Блумингтона: TRIP [HM05241]. Чтобы ответить на эту критику со стороны рецензента 2, мы:

      1) использовали вторую линию РНКи, нацеленную на Toll-2, из венского фондового центра: VDRC36205. Теперь мы показываем, что нокдаун этой линией ( MyD88GAL4> UAS-Toll-2RNAi [36205] ) имел тот же эффект, что и ранее используемая линия TRIP, вызывая потерю клеток в центральном мозге.Мы не считали необходимым делать это также с Toll-2GAL4 в клетках Kenyon, так как никакие манипуляции с каким-либо одним геном в любом случае не вызывали там эффекта. Эти данные подтверждают, что нокдаун Toll-2 вызывает потерю клеток в центральном мозге, подтверждая, что Toll-2 необходим для поддержания выживания нейронов.

      Эти новые данные представлены на Рисунке 2H и изменениях текста в подразделе «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      2) Мы сократили несколько Tolls с другими линиями RNAi до Toll-1, -2, -6 и -7, как показано на рисунке 7, теперь называемом рисунком 8.Ранее мы использовали строки: Bloomington Stocks: UAS-Toll-1RNAi: y [1] v [1]; UAS Toll-1-RNAi [P.TRiP.JF10491]; UAS-Toll-2RNAi: y [1] sc * v [1]; P {TRiP.HM05241} attP2 / TM3, Sb1; и VDRC36205. UAS-Toll-6RNAi: y [1] v [1]; P {TRiP.HMS04251} attP2; UAS-Toll-7RNAi: y sc v; P {TRIP.HM05230} attP2; UAS-Toll-8RNAi: yv; UAS Toll-8-RNAi [P.TRiP.HM05005].

      Теперь мы также использовали линии: UAS Toll-1 RNAi [TRiP JF01276] (BSC), UAS Toll-2 RNAi [V36305] (VDRC), UAS Toll-2 RNAi [V44386] (VDRC), w; UAS Toll-6 RNAi [V928] (VDRC), w ;; UAS Toll-7 RNAi (NIG III) (KDRC), UAS Toll-8 RNAi [V27098] (VDRC).

      Общие выводы не изменились. То есть у Tolls есть избыточные или перекрывающиеся функции в мозгу, и одновременное отключение нескольких Tolls ухудшает развитие мозга.

      Эти новые данные представлены на новых рисунках 8B, D, E и в подразделе «Платежи регулируют размер мозга в процессе развития и в критический период взрослого человека».

      4) Авторы используют вставки Gal4 в разные Tolls в качестве суррогата для своих выражений. Хотя это разумная отправная точка, такие закономерности должны быть подтверждены ортогональными методами, такими как окрашивание антител, гибридизация in situ или, как минимум, анализ генетического спасения.

      Автор обзора прав в том, что визуализация эндогенной мРНК или белка — лучший способ визуализировать, где экспрессируется ген. Мы использовали антитела против Toll-1, поскольку они коммерчески доступны (Santa Cruz Biotechnology (sc-33741) toll (d-300)) и были подтверждены другими (Khadilkar et al., 2017, и Lund, De Lotto и De Lotto, 2010).

      Однако получение хороших антител технически непросто, дорого, и ни один из этих методов не обеспечивает достаточно высокого разрешения для визуализации и идентификации экспрессирующих клеток.Поэтому мы благодарны редактору за то, что он освободил нас от экспериментальной реакции на эту критику. Антитела к Toll-6 и Toll-7 были созданы в прошлом как нашей группой, так и другими (McIlroy et al., 2013; Ward et al. 2015 Neuron), но они зашумлены, а разрешение клеток было низким, что препятствовало идентификации. экспрессирующих клеток. Это может быть связано с тем, что существует 9 Toll, и может быть неспецифическое связывание антител с множеством Toll. Таким образом, мы решили не пытаться генерировать больше антител ко всем Tolls, поскольку были обеспокоены тем, что результат может быть ненадежным, непредсказуемым и ограниченным в использовании.Драйверы GAL4 неоднократно зарекомендовали себя как лучший способ (например, с привязанными к мембране репортерами и клонами, такими как клоны FlyBow и MCFO) для визуализации и идентификации клеток, и были использованы для сопоставления полных цепей как в мозге личинок, так и в мозге взрослых особей. Коннектомы для электронной микроскопии (Zheng et al.2018 Cell; Eichler 2017 Nature и др.). Ключевым моментом является то, где размещается GAL4. Мы сгенерировали репортерные драйверные линии GAL4, которые воспроизводят пространственный паттерн экспрессии этих генов, по:

      1) RMCE из вставок MIMIC в безинтронную кодирующую область Toll-3, Toll-6, Toll-7 : поскольку эти гены не имеют интронов, полученные вставки GAL4 обязательно управляют их профилями эндогенной экспрессии.

      2) Доступны мухи Tollo MD806 , несущие вставку GAL4 всего на 180 пар оснований перед стартовым кодоном Toll-8 в пределах 5’UTR 500bp из Toll-8 . Поскольку вставка находится внутри транскрибируемой мРНК, это означает, что GAL4 обязательно будет управлять паттерном эндогенной экспрессии.

      3) Подделки CRISPR / Cas9 для Toll-2, Toll-4 и Toll-5 , где GAL4 был размещен непосредственно рядом с 5 ’начальным кодоном.Таким образом, GAL4 будет экспрессироваться как эндогенные гены.

      В заключение, у нас есть надежные доказательства того, что все использованные репортеры Toll воспроизводили свои эндогенные пространственные профили, демонстрируя, что эти инструменты подходят.

      Чтобы ответить этому рецензенту, мы улучшили пояснение в подразделе «Карта рецепторов Toll в мозге Drosophila ». Мы благодарны этому рецензенту за конструктивную критику, которая помогла улучшить нашу работу.

      Рецензент № 3:

      Настоящая рукопись Ли и др.исследует функцию членов семейства Toll в мозге взрослого Drosophila . Авторы показывают, что несколько членов семейства Toll обнаруживают частично перекрывающиеся паттерны экспрессии в различных областях мозга. Избыточная экспрессия одного из них (Toll-2) вызывает увеличение числа нейронов в центральном мозге и продолговатом мозге. Одновременное истощение нескольких членов семьи Толля, наоборот, уменьшает количество клеток в куколочном мозге. Авт. Предполагают, что члены семейства Toll действуют через Weckle и Yki, чтобы способствовать нейрогенезу взрослых путем деления популяции покоящихся предшественников.Хотя это потенциально захватывающее открытие, которое значительно улучшит наше понимание пластичности мозга взрослых, есть несколько областей, которые требуют улучшения, прежде чем рукопись может быть принята к публикации, как подробно описано ниже.

      1) Фенотип с потерей функции.

      Истощение Toll-2 в мозге взрослого человека не имеет фенотип, противоположный гиперэкспрессии Toll-2 (рис. 4A). Фактически, оба, по-видимому, увеличивают количество клеток, что трудно объяснить. Авторы предполагают, что Tolls могут действовать избыточно во взрослом мозге, что может объяснить, почему истощение Toll-2 не снижает количество нейронов.Они истощают несколько Tolls вместе без какого-либо временного контроля, вызывая летальность куколки и уменьшение размера мозга (рис. 7). Однако, поскольку раннее истощение Toll вызывает широко распространенные фенотипы развития, совсем не ясно, имеют ли результаты, представленные на фиг. 7, какое-либо отношение к фенотипам сверхэкспрессии Toll-2 взрослых, которые наблюдают авторы. Авторы должны истощить различные комбинации Toll в мозге взрослых с помощью tub-GAL80ts, как они это делают на других рисунках, и посмотреть на их влияние на количество клеток, их гибель и пролиферацию.Если их гипотеза верна, истощение Toll в мозге взрослого человека должно поставить под угрозу рост в критический период.

      С уважением к этому рецензенту, мы согласны с тем, что все это интересно, но позвольте нам отметить, что это очень сложные и трудоемкие эксперименты, и эта рукопись уже потребовала 5 лет непрерывной, ежедневной, очень тяжелой работы, включая 5 месяцев только на эту доработку. Работа со всеми этими пунктами займет гораздо больше времени, чем требуется для пересмотра.

      Мы благодарны этому рецензенту за это предложение, в результате которого были получены очень интересные данные. Технически невозможно было проверить эффект трех Toll-RNAis только в критический период из-за ограничений генетики. Таким образом, мы условно сбили два пункта сбора за один раз (новые данные приведены на рисунке 8 — приложение к рисунку 1): Toll-2, -6 и Toll-6, -7 . С tubGAL80 ts , MyD88GAL4> hisYFP, Toll-2, Toll6RNAi это привело к увеличению числа клеток в центральном мозге.Toll-6 может быть проапоптотическим (Foldi et al., 2017), что вносит вклад в этот генотип. Нокдаун Toll-6, -7 с помощью tubGAL80 ts , Toll2pTVGAL4> Toll-6, Toll-7RNAi не повлиял на размер мозга, но нокдаун Toll-2, Toll-6RNAi повлиял на большинство мозгов были меньше контрольных, но 25% были больше. Вариабельность этих фенотипов указывает на лежащие в основе сложные компенсаторные взаимодействия между множественными Tolls. Ячейки Kenyon, которые сопротивлялись множественным манипуляциям с Toll-2, пострадали от нокдауна нескольких Tolls.Дальнейшее тестирование клеток Кеньона было важным, поскольку Гейзенберг, Барт и Технау ранее показали, что грибовидные тела демонстрируют структурную пластичность, зависящую от опыта. Таким образом, мы протестировали tubGAL80ts, Toll2GAL4> UAShistoneYFP, UAS-Toll-2RNAi, UAS-Toll-6RNAi и UAS-Toll-7RNAi, UAS-Toll-6RNAi дублируются на фоне гетерозиготного мутанта Toll-2 (Toll-2GAL4 является мутантом). Это показало, что нокдаун нескольких Tolls в критический период взрослых дезорганизует только кластеры KC, которые располагаются глубже по оси A / P и количеству клеток Kenyon.Интересно, что нокдаун Toll-6, -7 привел к увеличению KC. Эти данные показывают, что дорожные сборы имеют дублирующие функции в KC также в критический период для взрослых, и что разные сборы по-разному влияют на KC. Эти новые данные показаны на новых рисунках 8F, G, H и в подразделе «Платежи регулируют размер мозга в процессе развития и в критический период взрослого человека».

      Следуя мнению этого рецензента, мы также проверили, влияет ли условное усиление функции Toll-2 и его последующих эффекторов в критический период взрослого только на размер мозга.И мы обнаружили, что это действительно так: сверхэкспрессия Toll-2, MyD88RNAi или wek увеличивала размер мозга у взрослых. Эти замечательные результаты предоставили убедительные доказательства того, что сигнальная система Toll регулирует структурную пластичность мозга у взрослых. Эти новые данные представлены на Рисунке 8I, K.

      Мы не можем объяснить все фенотипы и всю встреченную изменчивость, но это связано с очень четким сообщением. Толлы регулируют множество сигнальных путей, которые модулируют выживание, смерть, покой и пролиферацию клеток.У каждого платного маршрута есть разные предпочтения для этих путей. Более того, поскольку их паттерны экспрессии перекрываются, и потеря функции в одном Toll может повлиять на реакцию других, диапазон потенциальных результатов очень сложен. См. Обсуждение.

      2) Взрослые нейрогенные предшественники

      Авт. Предполагают, что они идентифицировали популяцию потенциально пролиферативной популяции взрослых предшественников MyD88 + / Dpn +. Чтобы подтвердить это открытие, они должны, по крайней мере, напрямую показать, что эти клетки MyD88 / Dpn могут пролиферировать с использованием окрашивания Ph4 / EdU в мозге взрослого человека при экспрессии Toll-2 с соответствующим совместным окрашиванием.

      Взрослые предки были ранее обнаружены Ито (Като и др., 2009), Харихараном (Зигрист и др., 2010), Морено (Фернандес-Эрнандес и др., 2013 г., Current Biology) и Коэном (Foo и др., 2017 г.). ) лаборатории. Наши данные согласуются с приведенным выше и показывают, что взрослые предшественники в основном остаются в покое с помощью передачи сигналов MyD88, а усиление функции Toll-2 через Wek может перекрывать MyD88 и заставлять их делиться.

      EdU / BrdU выявляет клетки в S-фазе, и мы уже показали, что избыточная экспрессия Toll-2 только у взрослых с тепловым шоком GAL4 увеличивает количество клеток PCNA-GFP + в S-фазе.Чтобы улучшить представление этих данных, мы добавили подсчет клеток PCNA-GFP +, эти данные представлены на новом рисунке 5E. Это показывает, что сверхэкспрессия Toll-2 в мозге взрослого человека увеличивает частоту циклического перехода клеток от фазы G1 к фазе S.

      ph4 выявляет клетки в митозе, который очень краток и, следовательно, трудно обнаружить. Для пересмотра мы попробовали анти-ph4, но не получили надежных данных. Мы также попытаемся создать клоны Toll-2 с усилением функции Twin-Spot MARCM, которые, в отличие от стандартных клонов MRCM, представленных на фиг. 5B, C, также выявляли бы материнскую клетку-предшественницу.Однако этот метод не работал так хорошо, как ожидалось, поскольку GFP / RFP-РНК не выключали экспрессию репортеров, и полученные клоны имели смешанные сигналы. Так что эти результаты пришлось отбросить. Чтобы преодолеть эти проблемы, мы использовали еще два альтернативных подхода:

      i) Мы использовали слитый белок Stg-GFP для визуализации клеток в переходе G2 / M: String (Stg) активируется CyclinB и Yorkie, чтобы инициировать переход G2-M и вступление в митоз. Таким образом, слитый белок Stg-GFP выявляет клетки, которые находятся в G2 и собираются делиться.Мы обнаружили много клеток Stg-GFP + как в контрольном мозге взрослых, так и в тех, которые сверхэкспрессируют Toll-2. Эти новые данные представлены на новом рисунке 5I и в подразделе «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозге куколки и взрослого человека».

      ii) Мы использовали Fly-FUCCI, который маркирует только циклические ячейки. FUCCI выявляет клетки в фазах G1, G1 / S, G2 и G2 / M, но не клетки в G0 (т.е. вышедшие из клеточного цикла). Он управляет экспрессией ядерных слитых белков с факторами клеточного цикла E2F и циклином-B.Таким образом, degronE2F-GFP визуализируется зеленым цветом в точках G1, G2 и M и разрушается, когда клетки входят в S-фазу; а degron-CyclinB-RFP визуализируется красным цветом в точках S, G2 и M, и он разрушается, когда клетки попадают в G1. Таким образом, потеря сигнала / ячеек GFP указывает на переход от G1 к S, потеря сигнала / ячеек RFP указывает на переход от M к G1 (т.е. клетки только что вышли из митоза). В комбинации 9 клетки, которые имеют красный + зеленый цвет, находятся в G2 или M, клетки, которые являются только зелеными, либо только завершают деление клеток, либо находятся в G1, а клетки, которые только красные, находятся в фазе S.Мы сверхэкспрессировали Toll-2 и FUCCI только у взрослых, используя Toll-2 GAL4, tubGAL80ts x UAS-FUCCI по сравнению с UAS-FUCCI, UAS-Toll-2 , и проанализировали клетки в G1 (зеленый) , Фазы S (красный), G2 и M (зеленый и красный). В контрольном мозге взрослого человека были клетки в фазах G1, S и G2. Чрезмерная экспрессия Toll-2 приводила к увеличению количества клеток в каждой из этих фаз, что означает, что Toll-2 индуцирует клеточный цикл. Эти новые данные представлены на новом рисунке 6A-D и в подразделе «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозге куколки и взрослого человека».

      iii) Мы визуализировали клетки MyD88 + с FUCCI и анти-Dpn. Однако, поскольку мы уже показали, что большинство предшественников Dpn + во взрослом мозге были MyD88 +, мы окрашивали мозг как FUCCI, так и Dpn. Мы обнаружили, что при сверхэкспрессии Toll-2 большинство клеток Dpn + находились в G1 (т.е. GFP + RFP-), что означает, что они либо только что делились, либо находились в состоянии покоя в G1, а некоторые находились либо в S-фазе, либо в G2 / M. Эти новые данные представлены на новом рисунке 6K и в вышеупомянутом подразделе.

      3) Сигнализация в нисходящем направлении.

      Эта часть рукописи, в частности связь с Yki, нуждается в усилении.

      — Рисунок 6K: элемент управления, в котором истощается только Yki, отсутствует и должен быть предоставлен. Возможно, спасение, которое наблюдают авторы, — это промежуточный фенотип между экспрессией Toll-2 и истощением Yki.

      Мы согласны, теперь мы предоставляем эти новые данные ( MyD88GAL4, UAShisYFP, tubGAL80ts x UAS-yki-RNAi ) на новом рисунке 7E, E ’и в подразделе« Toll-2 способствует клеточному циклу в мозгу через йорков ».

      — Чтобы убедительно связать Yki с передачей сигналов Toll-2, авт. Должны проверить, может ли сверхэкспрессия Toll-2 активировать регуляцию репортеров Yki, таких как DIAP1-GFP или ex-LacZ, и / или способствовать проникновению в ядро ​​Yki.

      Мы попробовали следующие подходы:

      a) Мы проверили, способствует ли Toll-2 экспрессии репортеров гена-мишени Yki ex-lacZ и diap1-lacZ (который ближе к эндогенной экспрессии diap1, чем diap1-GFP ), в Toll-2GAL4, tubGAL80ts x ex- lacZ; UASToll-2 и Toll-2GAL4, tubGAL80ts x UASToll-2; diap1-lacZ , с окрашиванием против βgal.Однако наблюдалась огромная перманентность lacZ, и практически все клетки в головном мозге были βgal +, также в контроле. Мы пробовали несколько протоколов, чтобы попытаться уничтожить lacZ с помощью тепла, но это не сработало. Так что этот эксперимент был технически невыполнимым.

      Вместо этого мы визуализировали Stg-GFP, который также является целью йорков — как в контроле, так и при избыточной экспрессии Toll-2. Эти новые данные представлены на новом рисунке 5I и в подразделе «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозге куколки и взрослого человека».

      b) Мы проверили, способствует ли Toll-2 проникновению в ядро ​​Yki, визуализированного с помощью антител против Yki, в Toll-2GAL4 tubGAL80ts x UASToll-2 и контрольном мозге дикого типа. Мы запросили антитела против Yki в лабораториях Duojia Pan, Kieran Harvey, Iswar Hariharan, Nic Tapon и Kenneth Irvine и получили две аликвоты против Yki, независимо созданные Duojia Pan и Ken Irvine. Оба антитела были протестированы в ЦНС личинок и куколок в качестве положительного контроля. К сожалению, в наших руках ядерный сигнал был недостаточно хорошим относительно фона / цитоплазмы в положительных контролях, чтобы предоставить надежные данные для ЦНС.Таким образом, этот эксперимент тоже был технически невыполнимым.

      c) Мы проверили, способствует ли Toll-2 проникновению Yki-GFP в ядро ​​мозга Toll-2GAL4, tubGAL80ts x Yki-GFP, UASToll-2 . Для этого мы получили два независимо созданных запаса слитого белка Yki-GFP от Nic Tapon и Harvey Kiran. Это сработало. Мы обнаружили 10 обильных клеток Yki-GFP + в нормальном мозге в контроле. Мы также обнаружили изменение в распределении клеток Yki-GFP + в головном мозге со сверхэкспрессией Toll-2.Эти клетки было трудно подсчитать по всему мозгу отчасти потому, что клеток было много, а отчасти потому, что автоматический подсчет с помощью DeadEasy был невозможен из-за широких областей с цитоплазматическим сигналом. Таким образом, мы подсчитали клетки Yki-GFP + вручную в трех различных областях интереса (ROI): мозговом веществе зрительной доли, субэзофагальном ганглии (SOG) и переднем верхнем левом углу центрального мозга. Данные показали, что: (1) в нормальном мозге взрослого человека есть клетки в G2-M; (2) и эта сверхэкспрессия Toll-2 вызвала либо бимодальное распределение — в некоторых мозгах было меньше клеток, в некоторых — с большим количеством клеток, чем в контроле, — либо увеличение количества клеток с ядерным Yki.Транспортировка Yki очень динамична, и клетки перемещаются в ядро ​​и из него (см. Manning et al., 2018. По мере цикла клеток и перехода между фазами (например, G2-M в G1 или G0) они могут перемещать Yki из ядра. ядра или даже подавляют его. Таким образом, эти данные указывают на то, что Toll-2 стимулирует клеточный цикл. Эти новые данные представлены на новом рисунке 7A-D и в подразделе «Toll-2 способствует клеточному циклу в мозге посредством Йорки ».

      — На рисунке 6K авторы делают вывод о сигнальном пути, в котором Weckle и JNK способствуют активности Yki ниже Toll-2.Если они хотят доказать это, они должны исследовать гены-мишени Yki / ядерную локализацию при экспрессии Toll-2 с истощением Weckle / JNK и без него.

      Мы ранее публиковали, что Wek функционирует ниже Tolls и выше JNK в контексте содействия апоптозу (Foldi et al., 2017), а другие ранее опубликовали, что JNK функционирует выше Yki (Katsukawa et al., 2018). Мы также ранее опубликовали, что Wek и MyD88 являются ключевыми внутриклеточными адаптерами Toll, которые могут колебаться между различными клеточными исходами ниже Tolls (Foldi et al., 2017). Таким образом, ключевой ген для тестирования — это wek, а не JNK.

      Эксперименты по эпистазу, предложенные рецензентом 3, были бы следующими: MyD88GAL4, tubGAL80ts , скрещенные с UAS Toll-2, UAS wek-RNAi и визуализация ядерного Yki с антителами против Yki, плюс контроли. Мы пробовали это. Однако антитела против Yki не работали, см. Выше, поэтому это невозможно было сделать. Введение Yki-GFP в указанные выше генотипы потребовало бы создания рекомбинантов плюс 2 комбинации хромосом nd и 3 rd , плюс затем эксперимент требует разведения при 18 ° C, что делает генетику только для этого эксперимента продолжительностью 6 месяцев — плюс время, необходимое для проведения эксперимента.Это было непропорционально для пересмотра.

      В качестве альтернативного подхода мы проверили, помогает ли нокдаун wek, как и yki-RNAi, также увеличить количество клеток, вызванное усилением функции Toll-2: MyD88GAL4 UAShisYFP, tubGAL80ts x UAS Toll-2, UAS wek- РНКи . И действительно, это так: нокдаун yki или wek спасает увеличение числа клеток, вызванное сверхэкспрессией Toll-2. Эти данные показали, что и Yki, и Wek функционируют ниже по течению от Toll-2, чтобы регулировать количество клеток в критический период взрослых.Эти новые данные представлены на новых рисунках 7E, E ’и в подразделе« Toll-2 способствует клеточному циклу в мозгу через йорков ».

      [Примечание редакции: далее следует ответ авторов на второй раунд рецензирования.]

      […] 1) Избыточная экспрессия Toll-2 явно увеличивает количество клеток, но истощение Tolls вызывает сложные фенотипы, что делает интерпретацию данных проблематичной. Авторы по-прежнему заявляют в Резюме, что «Toll-2, потеря функции вызвала гибель клеток и нейродегенерацию», но, на мой взгляд, это вводит в заблуждение, потому что, как я указывал в моем первоначальном обзоре, эти ЦНС сильно нарушены, и это не так. ясно, что вызывает гибель клеток.Авторы предоставили новые данные о временно ограниченном отключении Toll, но результаты по-прежнему довольно запутанные, и такие утверждения, как «Параметры сигнализации могут измениться со временем, но как это происходит, не ясно». не особо полезны. Я понимаю, что авторы провели много экспериментов, чтобы решить эту проблему, но я бы посоветовал им быть более осторожными в своих интерпретациях и ясно указать в Обсуждении, что все может быть не так просто, как показывает эксперимент с усилением функции Toll-2. предложить.

      Мы благодарим рецензентов за их отзывы, так как это помогает нам улучшить нашу рукопись. Теперь мы отредактировали текст, следуя рекомендации быть более осторожными в интерпретациях и подчеркнув сложность исходов междугородной сигнализации в Обсуждении.

      Позвольте мне обсудить, что в заявлении выше есть отдельные вопросы.

      1) «истощение Tolls вызывает сложные фенотипы, что делает интерпретацию данных проблематичной»….«Эти ЦНС сильно повреждены, и неясно, что вызывает гибель клеток».

      Это предложение неоднозначно, и нам интересно, ссылается ли рецензент на нокдаун нескольких Tolls на рисунке 8, которые уменьшили размер мозга. Фенотип множественного нокдауна Toll , скорее всего, является результатом снижения выживаемости клеток и уменьшения пролиферации клеток на протяжении всего развития. Мы предоставляем все больше доказательств того, что Toll-2 способствует пролиферации клеток (например, новые рисунки 6 и 7).Вопрос о гибели клеток рассматривается ниже.

      Чтобы прояснить моменты, сделанные в отношении множественного фенотипа Toll , мы изменили текст в Результатах и ​​переписали Обсуждение.

      2) «Авторы по-прежнему заявляют в Резюме, что« Toll-2, потеря функции вызвала гибель клеток и нейродегенерацию », но, на мой взгляд, это вводит в заблуждение, потому что, как я указал в моем первоначальном обзоре, эти ЦНС сильно нарушены. и неясно, что вызывает гибель клеток.”

      Автор обзора сомневается в интерпретации того, что потеря функции Toll-2 вызвала гибель клеток и нейродегенерацию, потому что «истощение Tolls» приводит к «сильному нарушению и неясно, что вызывает гибель клеток».

      В ответ на запросы обозревателей для исправленной версии мы предоставили доказательства того, что потеря функции Toll-2 вызывает апоптоз, который был визуализирован с помощью Dcp1 (рис. 2G). Это продемонстрировало, что потеря Toll-2 вызывает гибель клеток. Мы также предоставили дополнительные доказательства в пересмотренной версии, что нокдаун Toll-2 с использованием нескольких РНК, а также нокдаун MyD88-RNAi оба вызвали потерю клеток (рис. 2H), фактически потерю клеток MyD88 +.Таким образом, потеря функции Toll-2 и через MyD88 индуцировала апоптоз и потерю клеток. Мы уже опубликовали исчерпывающий механистический анализ, демонстрирующий, что рецепторы Toll способствуют выживанию клеток через MyD88 и гибели клеток через Sarm (Foldi et al., 2017 «Одна из 10 лучших статей 2017 года»). Более того, это эволюционно консервативно, поскольку у млекопитающих MyD88 способствует выживанию клеток и гибели клеток Sarm (Kim et al., 2007; Mukherjee et al., 2015). В пересмотренной версии мы представили новые доказательства того, что усиление пути MyD88, способствующего выживанию, путем нокаутации ингибитора NFκB Cactus или проапоптотического JNK, увеличивает количество клеток (рис. 4E).Это продемонстрировало, что передача сигналов Toll (s) через путь MyD88 поддерживает выживание нейронов в головном мозге.

      Мы также показали, что Toll-2 не проапоптотический, поскольку сверхэкспрессия Toll-2 не уменьшала количество клеток.

      Мы также показали, что Toll-2 вызывает нейродегенерацию. Toll-2 мутантные клоны MARCM приводили не только к массивной потере клеток, но также к атрофии аксонов и неправильной маршрутизации, а также к потере дендритов в оставшихся клетках (рис. 3A-G). Мы показали, что мутанты с потерей функции Toll-2 уменьшили продолжительность жизни, нарушили лазание и нарушили локомоцию — стандартные поведенческие доказательства нейродегенерации, используемые сообществом Drosophila .

      Таким образом, мы продемонстрировали, что потеря функции Toll-2 вызывала апоптоз, вызывала потерю нейронов, вызывала атрофию и неправильную маршрутизацию нейритов, нарушение долголетия и поведения. Это доказательство того, что потеря функции Toll-2 вызывает нейродегенерацию. Мы продемонстрировали, что потерянные нейроны были MyD88 +, что потеря функции MyD88 и также вызвала потерю нейронов MyD88 +, и что количество нейронов можно восстановить, включив передачу сигналов MyD88. Таким образом, это продемонстрировало, что механизм, лежащий в основе регуляции выживаемости клеток в головном мозге, был таким же, как описано ранее для куколки (см. Foldi et al., 2017).

      В ответ на этот рецензент, чтобы прояснить вопросы, касающиеся выживаемости клеток, гибели клеток и нейродегенерации, мы изменили текст в разделе «Результаты» и переписали обсуждение.

      3) «Авторы предоставили новые данные о временно ограниченном отключении Toll, но результаты по-прежнему довольно запутанные, и такие утверждения, как« Параметры сигнализации могут измениться со временем, но как это происходит, не ясно ». не особенно полезны… .. четко укажите в Обсуждении, что все может быть не так просто, как можно было бы предположить из экспериментов по усилению функции Toll-2.”

      Действительно, мы предоставили доказательства того, что условное нокдаун Toll-2 у взрослых может вызвать компенсаторную реакцию, приводящую к сложному фенотипу, и что Tolls также имеют избыточные функции, например, нокдаун только Toll-2 не повлиял на клетки Kenyon, тогда как нокдаун 2 или более Tolls повлиял. Например, в первоначальной версии мы заявили: «До сих пор данные соответствовали тому, что Toll-2 поддерживал выживание нейронов через канонический путь MyD88 в мозге.Однако несколько Tolls могут регулировать этот путь, и Tolls также могут способствовать апоптозу через неканонические сигнальные пути (Foldi et al., 2017), таким образом, изменение уровней Toll-2 может вызывать компенсацию другими Toll, усугубляя фенотипы ». В пересмотренной версии мы предоставили новые доказательства того, что и избыточность, и компенсация вносят вклад в фенотипы, поскольку условное нокдаун двух Tolls за один раз изменило количество клеток, но фенотипы различались в зависимости от различных комбинаций Toll (рис. 8F).Это означало, что каждый Toll может вызывать различные результаты (как мы предложили в Foldi et al., 2017), и нокдаун одного Toll может вызвать компенсаторную реакцию другого Toll , и не обязательно в том же направлении ( Рисунок 8F). Действительно, сигнализация с помощью системы взимания дорожных сборов сложна.

      Чтобы прояснить вопросы, касающиеся избыточности и компенсации, мы уточнили текст в разделах «Результаты» и «Обсуждение».

      В заключение, чтобы ответить на опасения этого рецензента, мы: (1) отредактировали реферат; (2) отредактировал текст в разделе «Результаты и обсуждение».

      Мы благодарим этого рецензента за его отзыв и надеемся, что он удовлетворен нашими улучшениями в рукописи.

      2) «Активация Yki по платным дорогам. Авторы снова провели больше экспериментов, но, как они указывают, как увеличение ядерной локализации Yki-GFP, так и увеличение stg-GFP может просто происходить в результате увеличения клеточного цикла. В отсутствие каких-либо данных о мишенях Yki, не связанных с клеточным циклом, и какого-либо четкого молекулярного механизма, связывающего Yki с Toll-2, я нахожу такие утверждения, как «Toll-2 индуцировал цикл взрослых клеток-предшественников по новому пути, зависимому от Векля и Йорки» вводить в заблуждение.Я бы посоветовал авторам быть более осторожными и четко заявить, что активация Yki может быть косвенным следствием пролиферации клеток, индуцированной Toll-2. Они могут сказать, что может существовать сигнальный путь, связывающий Toll-2 с Yki, но это потребует дальнейшего изучения в будущем ».

      Рецензент утверждает, что новые данные Yki-GFP, предоставленные для этой пересмотренной версии — вместе с ранее предоставленными данными Stg-GFP — являются свидетельством пролиферации клеток, но не обязательно в результате прямой активации Toll-2 Yki через Wek.Поскольку Stg необходим для пролиферации клеток и является мишенью для Yki, предположительно автор обзора имеет в виду, что триггер пролиферации клеток, индуцированный Toll-2, может находиться выше по течению. Позвольте мне прокомментировать вышеперечисленное.

      Мы рады, что этот рецензент считает, что Stg (цель Yki) и новые данные Yki (Рисунок 7) являются удовлетворительным доказательством клеточного цикла, индуцированного Toll-2.

      Прямая связь передачи сигналов Toll с Yki уже была опубликована другими исследователями как в контексте иммунитета, так и в контексте клеточной конкуренции (Liu et al., 2016; Кацукава и др., 2018). Таким образом, было бы разумно предположить, что Toll-2 может в некоторых контекстах также использовать те же маршруты, что и Toll-1.

      Мы согласны с этим рецензентом, что наши данные не позволяют нам утверждать, что Toll-2 активирует Wek, который активирует Yki, и что эти три фактора связаны линейным путем. Однако мы предоставили генетические доказательства эпистаза, что Yki функционирует ниже Toll-2, поскольку нокдаун yki-RNAi спасает увеличение числа клеток, вызванное сверхэкспрессией Toll-2 .В пересмотренной версии мы представили новые доказательства того, что Wek также функционирует ниже по течению от Toll-2, поскольку нокдаун wek-RNAi спасает увеличение числа клеток, вызванное сверхэкспрессией Toll-2 . Что мы не тестировали и не показывали, так это то, находится ли Wek выше Yki и связаны ли Toll-2, Wek и Yki линейным родством в одном и том же пути.

      Таким образом, чтобы ответить на эту критику со стороны этого рецензента и улучшить интерпретацию наших данных, в то же время точно представляя доказательства, мы сейчас: (1) отредактировали реферат; (2) переработал текст в «Результаты и обсуждение»; (3) и исправленный рисунок 9C, где мы теперь показываем три возможных альтернативы: что Wek вызывает распространение независимо от Yki; что Wek активирует Yki неизвестным пока механизмом; или что Wek активирует Yki через JNK, как сообщалось ранее (Foldi et al., 2017), а также об активации Yki JNK (Katsukawa et al., 2018).

      https://doi.org/10.7554/eLife.52743.sa2

      Платных дорог Андхра-Прадеш

      из Toll Wiki

      Нажмите на карту, чтобы открыть вики-страницу о платных дорогах для страны / штата.

      Платные дороги Андхра-Прадеш

      Основные платные дороги в Андхра-Прадеш включают:

      • Национальное шоссе 5 (Новый NH65) (Тада — Шрикакулам)
      • Хайдарабад — Ченнаи (Новый No.NAM Expressway)
      • Курнул в Бангалор (KA) (NH 7, Новый NH 44)
      • Курнул в Кадапу (Скоростная автомагистраль Райаласима)
      • Кодад (TG) в Виджаявада (NH 9, Новый NH 16)
      • Кодад (TG) до Vijayawada (NH 9, New NH 16)
      • Eluru NH5 (New Nh26)
      • Tanuku NH5 (New Nh26)
      • Kakinada (без платных дорог)


      Калькулятор дорожных сборов Андхра-Прадеш рассчитывает дорожные сборы и расходы на топливо для автомобилей фургоны, джипы, грузовики, трейлеры, автобусы и мотоциклы для всех платных дорог в Андхра-Прадеш и близлежащих штатах.

      Платные площади под управлением NHAI

      Ниже приведен список платных станций NHAI в Андхра-Прадеше:

      Буданам Крэвэяу5 Крэвхэра 272.От 000 до 200000 км (новая цепь от 901,753 до 830,525 км)] Проект подключения порта Маршала Kijayawada Kijayawada (Км 135.469 к км 211.00)5 Проект подключения портов4 — Неллор (км 1182.802 — км 1366,547)
      Toll Plaza Name NH No. Участок шоссе
      Аганампуди 16 Вишакхапатнам — Анкапалли [км от 2,837,870 км до & км до км 740,255)]
      Amakathadu 7 Хайдарабад Бангалор (км 211.000 до км 462,164)
      Бадава 221 От Имбрахимпатнама до AP Telangana Border
      Беллупада 5 Иччапурам — Пинтола 9042 км Бол5 425 905 9042 Бол5 9042 Бол5 9042 9042 км Бол5 Чилкалурипет — Неллор (км 1182,802 — км 1366,547)
      Брахманапалли 71 Телангана, граница с Эрпеду
      Буданам 5 5 5 (Км 167.750 — 356,502 км)
      Чилакапалем 16 Шрикакулам — Чампавати (97,00 км — 49,00 км (новая цепь от км 606,204 до 654,204 км))
      Chintalapalem 565 Penchalkona к yerpedu
      Eethakota 16 Diwancheruvu — Siddhantham (км 901,753 до Km 950.283)
      Kalaparru 16 Gundugolanu — Виджаявада
      Kasepalli 44 и 7 Каридиконда — Марур
      Каза 16 Виджаявада — Чилакалурипет
      Кеесара 9
      Нандигама
      Лаксмипурам 16 Иччапурам — Нандигаон (226,15 км до 160,00 км (новая цепь с 477,054 км до 543,205 905 км) 16 Нандигама — Шрикакулам (от 160,00 км до 97,00 км (новая цепь, км 543,204 — км 606,204))
      Основная плата за проезд (Панчвати) 5 Вишакхапатнам Хайдарабад — Бангалор
      Mekalavaripalli 565 Markapuram to Vaggampalle
      Nathavalasa / Vizianagaram 16 Champavati.От 00 до 2,837 км (новая цепь от км 700,544 до 654,204 км)]
      Palempalli 40 Kadapa — Kurnool (167,750 км — 356,502 км)
      HYD3741 Panthangi 655 42
      Patancheru (Prograssive Construction Toll) (MoRTH) 65 (Old 9) Pune — Hyderabad
      Pottipadu 16 Gundugolanu — Vijayawada
      Rapur 565 Penchalkona к yerpedu
      Raviguntapalli 565 Markapuram Второстепенный для Vaggampalle
      Шахапур 44 Джатчерла — Котакатта (км от 80,050 до 135,740 км)
      Саллурпет 5 Тада — Неллорэмбур
      Tangutur 16 Chilkaluripet — Nellore (км 1182.802 — км 1366,547)
      Unguturu 16
      Unguturu 16 16 Анкапалли — Туни [358,00 км до 272,00 км (новая цепь с 830,525 км до 741,255 км)]
      Venkatachallam (старый Nellore) 5 (старый 1641)

      Как платить за проезд в Андхра-Прадеше

      Вы можете оплачивать дорожные сборы наличными на всех пунктах взимания дорожных сборов в Андхра-Прадеше.Некоторые пункты взимания дорожных сборов также принимают платежи с использованием FASTag, тега, который позволяет автоматически вычитать плату за проезд в электронном виде и позволяет проезжать через пункт взимания дорожных сборов, не останавливаясь для транзакции с наличными.

      Ниже приведен список пунктов взимания платы за проезд, которые принимают FASTag.

      Платные станции, принимающие FASTag

      Платная плата Amakthadu Anantapuram PRIVATE LIMITED 905 905 905 NI Ghapattan 905 ВМС ВМС США) (Vishakapatnam порт подключения)
      Plaza Name Plaza City Концессионер
      Chillakallu Кришна GMR
      Amakthadu41 905 MR MEP Infra Projects
      Плата за проезд в Маруре Anantapuram MEP Infra Projects
      Sullurpet Plaza (NH- 16), (старый NH-5)
      Budhanam Plaza (NH- 16), (старый NH-5) Nellore SWARNA TOLLWAY PRIVATE LIMITED
      Nellore Plaza (NH- 16), (старый NH-5) Nellore SWARNA PRIVATE LIMITED
      Keesara Plaza (NH-65), (старый NH-9) Vijaywada SWARNA TOLLWAY PRIVATE LIMITED 9 0542
      Каз Toll Plaza Mangalgiri Guntur IJM
      Bellupada Icchapuram NHAI
      Madapam Шрикакулы NHAI
      Chilakpelam Шрикакулы NHAI
      Nathavalasa Vizianagaram NHAI
      Agnampadi Vishakhapatnam NHAI
      Vempadu Vishakhapatnam NHAI
      Krishnavaram East Godavari NHAI
      Kalaparru West Годавари NHAI
      Pottipadu Krishna NHAI
      Bollapalli Toll Plaza Prakasam KMC и BSCPL Infrastructure41 905atur 905atur42 am KMC и BSCPL Infrastructure Ltd
      Musunur Toll Plaza Nellore KMC и BSCPL Infrastructure Ltd
      Panchvati Colony (Vishakapatnam Port Connectivity41 Vishakapatnam NHAI
      Laxmipuram Шрикакулам NHAI
      Palempalli Toll Plaza Kadapa Раяласима Скоростная Private Limited
      Chagalmarri Toll Plaza Kurnool Rayalasema Expressway Private Limited
      S.V Puram Toll Plaza Chittoor Transtroy
      Unguturu Toll Plaza West Godavari NHAI
      Eethakota East Godavari 905HA

      Плата за проезд в Андхра-Прадеш с FASTag

      Основная статья: FASTag в Индии

      FASTag — это электронная плата за проезд, которая работает на всех платных дорогах Андхра-Прадеша, соседних с ним штатов Ассам, Бихар, Западная Бенгалия и других штатов Индии и союзных территорий.Установив его на свой автомобиль, вы сможете проезжать через электронные пункты взимания платы за проезд, не останавливаясь, чтобы заплатить за проезд. Он автоматически списывает соответствующие расходы со связанной учетной записи. Помимо того, что это быстрый и безопасный способ оплаты дорожных сборов в Индии, это также дешевле, чем оплата дорожных сборов наличными.

      В настоящее время он работает на 350+ пунктах сбора платы за проезд на национальных и государственных автомагистралях в Индии. В будущем в рамках программы FASTag будет добавлено больше платных пунктов.

      Обратитесь к FASTag в Индии, чтобы узнать о его преимуществах, работе и многом другом.

      Расчет пошлин для Андхра-Прадеша и других штатов и союзных территорий Индии

      Рассчитайте маршруты, дорожные сборы и расходы на топливо для вашего путешествия на автомобиле, джипе, фургоне, внедорожнике, грузовике, легком автомобиле, автобусе и велосипеде в Андхра-Прадеш и других штатах и ​​союзных территориях Индии с помощью TollGuru Trip Calculator . Он также показывает самые дешевые, самые быстрые и другие оптимальные маршруты к пункту назначения, а также местоположение платных пунктов по маршруту, способы оплаты и многое другое.


      Rideshare, OEM, TMS, компании автопарка и другие транспортные компании могут использовать интеллектуальную информацию о дорожных сборах путем интеграции с TollGuru Toll API для предварительного расчета и согласования после поездки.

      Файлы cookie

      помогают нам предоставлять наши услуги. Используя наши услуги, вы соглашаетесь на использование файлов cookie.

      © 2021 MapUp Inc. Все права защищены. Используя этот сайт, вы соглашаетесь с Условиями использования и Политикой конфиденциальности. TollWiki ™ является товарным знаком MapUp Inc.

      За исключением случаев, предусмотренных применимым к вам законом об авторских правах, вы не можете копировать, воспроизводить или использовать в коммерческих целях или передавать какой-либо контент на этом веб-сайте, включая файлы, загружаемые с этого веб-сайта, без предварительного согласия или разрешения MapUp Inc.

      Платные дороги, магистрали, мосты и туннели Массачусетса

      Нажмите на карту, чтобы открыть вики-страницу о платных дорогах для страны / штата.

      Магистраль Массачусетса

      Массачусетская магистраль [1] , включая расширение Бостона, в местном масштабе называемое Mass Pike или Pike, 138-мильная платная автомагистраль I-90 начинается недалеко от международного аэропорта Логан на восточной границе Бостона и становится частью Автострада штата Нью-Йорк на соединительном узле Berkshire в Ханаане, штат Нью-Йорк.Магистраль пересекает штат, соединяя Бостон с крупными городами Спрингфилд и Вустер. Он поддерживается Министерством транспорта Массачусетса (MassDOT).

      Мосты Массачусетса

      Мемориальный мост Мориса Дж. Тобина [2] (бывший Мост через Мистик-Ривер или Мост Мистик / Тобин) простирается более чем на две мили от Бостона до Челси через Мистик-Ривер. Он находится в ведении Министерства транспорта Массачусетса. и проходит по американскому маршруту 1.По мосту проходят три полосы движения по маршруту US Route1 на двух уровнях. Трафик в северном направлении на нижнем уровне и трафик в южном направлении на верхнем уровне.

      Тоннели Массачусетса

      Туннель Теда Уильямса

      Туннель Теда Вильямса [3] , также известный как туннель Уильямса, представляет собой автомобильный туннель под Бостонской гаванью в Бостоне, штат Массачусетс. Он соединяет Южный Бостон с международным аэропортом Логан, проходя заключительный отрезок автомагистрали Массачусетс (межштатная автомагистраль I-90) под Бостонской гаванью, обеспечивая прямой доступ к Маршруту 1A в Восточном Бостоне.Калькулятор дорожных сборов TollGuru не показывает скидки, двухосные дорожные сборы отображаются для тегов, отличных от массовых E-ZPass.

      Туннель Каллахан

      Туннель Каллахан [4] , официально именуемый лейтенантом Уильямом Ф. Каллаханом-младшим. Туннель [5] , является одним из четырех и одним из трех автомобильных туннелей под Бостонской гаванью в Бостоне, штат Массачусетс. Он обеспечивает движение от Норт-Энда до международного аэропорта Логан и маршрута 1А в Восточном Бостоне. Калькулятор дорожных сборов TollGuru не показывает скидки, двухосные дорожные сборы отображаются для тегов, отличных от массовых E-ZPass.

      Sumner Tunnel

      Туннель Самнер [6] обеспечивает движение транспорта под Бостонской гаванью в одном направлении, от международного аэропорта Логан и маршрута 1A в Восточном Бостоне. Движение, направляющееся на южную I-93 и западную магистраль Массачусетса (I-90), обычно направляется к туннелю Теда Вильямса. Калькулятор дорожных сборов TollGuru не показывает скидки, двухосные дорожные сборы отображаются для тегов, отличных от массовых E-ZPass.

      Калькулятор дорожных сборов Массачусетса рассчитывает дорожные сборы и расходы на бензин для автомобилей, грузовиков, прицепов, автобусов, жилых автофургонов и мотоциклов для всех этих мостов и туннелей.Плата взимается как за пики, так и вне пределов пиков во время вашего путешествия.

      Тарифы на проезд по мостам и туннелям Массачусетса

      Владельцы двухосных автомобилей могут платить следующие сборы:

      • Мемориальный мост Мориса Дж. Тобина: плата за проезд по метке E-ZPass составляет 1,25 доллара США, плата за проезд по табличке составляет 1,55 доллара США, а наличные деньги не принимаются.
      • Туннель Каллахан: проезд по метке E-ZPass составляет 1,75 доллара, плата за проезд по табличке — 2 доллара.05, и наличные не разрешены.
      • Sumner Tunnel: плата за проезд по метке E-ZPass 1,75 доллара США, плата за проезд по пластине 2,05 доллара США, наличные деньги не допускаются.


      Тарифы на проезд на этой странице могут не обновляться в последнее время. Пожалуйста, обратитесь к нашим калькуляторам дорожных сборов и проездных билетов и к API дорожных сборов, чтобы узнать последние ставки дорожных сборов. Пожалуйста, отправьте нам отзыв, если тарифы на проезд неточны. Мы немедленно обновим информацию.

      Как рассчитываются дорожные сборы для грузовиков в Массачусетсе

      Самнер-туннель, Тед-Уильям-Туннель, Мемориальный мост Тобина — сборы за проезд для грузовиков с осями.

      Плата за проезд для грузовых автомобилей на магистральной дороге Массачусетса основана на классе транспортных средств [7] в зависимости от количества осей. Однако они отображаются по классам. В следующей таблице показано соответствие между классом транспортного средства магистрали Массачусетса и типом транспортного средства.

      Тип транспортного средства TollGuru Класс транспортного средства магистрали Объяснение
      Двухосный грузовик Класс 5 любой двухосный автомобиль с двойными задними шинами, включая тягачи37 905-30 осей Class 6 тягач, тягач, грузовик или жилой дом со сдвоенными колесами и 3 осями
      Грузовик 4-осный Class 7 автовоз, грузовик, тягач, жилой дом или любое транспортное средство с сдвоенные колеса и 4 оси
      Грузовик с 5 осями Класс 3 — грузовик с 5–9 осями Седельный тягач, автовоз или грузовик с 5–9 осями
      Грузовик с 6 осями Класс 3 — Грузовик с 5–9 осями тягач, автовоз или грузовик с 5–9 осями

      Калькулятор дорожных сборов рассчитывает стоимость дорожных сборов и бензина для грузовиков всех классов в Массачусетсе.

      Как платить за проезд в Массачусетсе

      EZDriveMA [8] , программа электронной системы взимания платы за проезд в Массачусетсе, работает без пунктов взимания платы, шлагбаумов или ворот. Вы можете использовать один из четырех способов оплаты.

      • E-ZPass MA — опция на основе предоплаченного транспондера (бирки) со скидкой
      • E-ZPass — предоплаченный транспондер (бирка), выданный агентством из другого штата
      • Pay By Plate MA Registered — A Вариант счета на основе номерного знака
      • Счет-фактура с оплатой по номеру — Вариант счета-фактуры на основе номерного знака


      Поскольку нет обслуживаемых платных пунктов или автоматических барьеров, вы не можете платить наличными.Узнайте больше о вариантах оплаты дорожных сборов в Массачусетсе.

      Как оплатить пропущенные дорожные сборы в Массачусетсе

      Если у вас не было учетной записи E-ZPass MA или совместимого E-ZPass из других штатов, вы бы заплатили более высокую плату за проезд (счет отправляется на зарегистрированный адрес номерного знака). Но если бы вы управляли арендованным автомобилем, вы не смогли бы оплачивать проезд напрямую в Департамент транспорта Массачусетса (MassDOT). Счета за пропущенные сборы за аренду автомобилей отправляются в компанию по аренде автомобилей.Поэтому, в зависимости от политики агентства по аренде автомобилей, вам, возможно, придется заплатить дорожный сбор своей компании по аренде автомобилей.

      Чтобы лучше узнать ваши варианты, мы предлагаем вам обратиться в Департамент транспорта Массачусетса (MassDOT), агентство, которое управляет дорожными сборами в Массачусетсе, по телефону (877) 627-7745 или отправьте свой запрос по адресу customer.service@ezdrivema .com. На их странице обслуживания клиентов есть опция для живого чата. Вот ссылка на службу поддержки клиентов MassDOT [9] .

      Что такое E-ZPass MA

      E-ZPass — это транспондер (бирка), который вы можете установить в свой автомобиль для оплаты проезда. Вам не нужно останавливаться, чтобы платить за проезд. Посетите страницу E-ZPass MA, чтобы узнать больше о странах, принимающих E-ZPass, и многое другое.

      Толлинговые агентства Массачусетса и контакты

      MassDOT управляет Mass Pike и мостами. Для получения дополнительной информации перейдите по следующим ссылкам.

      • Департамент транспорта Массачусетса (MassDOT) [10] владеет и управляет Mass Pike
      • Департамент транспорта Массачусетса (MassDOT) [11] владеет и управляет туннелем Самнер, туннелем Теда Уильямса, мостом Тобин и туннелем Каллахан
      • EZ-Pass вопросы [12]

      Расчет дорожных сборов для Массачусетса и других штатов США

      Рассчитывайте маршруты, дорожные сборы и расходы на топливо для вашего путешествия на автомобиле, грузовике, такси, автобусе, автоприцепе (с прицепом или без него) в Массачусетсе и других штатах США с помощью TollGuru Trip Calculator .Он также показывает самые дешевые, самые быстрые и другие оптимальные маршруты к пункту назначения, а также местоположение платных пунктов по маршруту, способы оплаты и многое другое.


      Rideshare, OEM, TMS, компании автопарка и другие транспортные компании могут использовать интеллектуальную информацию о дорожных сборах путем интеграции с TollGuru Toll API для предварительного расчета и согласования после поездки.

      Карта Toll-рецепторов лежит в основе структурной пластичности мозга

      [Примечание редактора: авторы повторно представили исправленную версию статьи на рассмотрение.Ниже приводится ответ авторов на первый раунд обзора.]

      Рецензент № 1:

      Это интересная рукопись о роли Toll-рецепторов в установлении структурной пластичности мозга, подготовленная группой, внесшей важный вклад к характеристике биологии рецепторов членов семейства Толля. Предпосылки и цели великолепно представлены во Введении. Затем в рукописи представлен впечатляющий объем данных, касающихся вклада рецепторов Toll в структурную пластичность мозга у мух.Модель, представленная авторами, привлекательна, но не совсем убедительна, в частности, потому, что многие из используемых инструментов не проходят валидацию и отсутствуют элементы управления. Ниже приведены мои основные комментарии:

      1) Подраздел «Карта рецепторов Toll в мозге Drosophila », последний абзац: отсутствует ссылка на используемое антитело против Toll-1 и подтверждение его специфичности.

      Anti-Toll-1 уже был одобрен другими. Это коммерческое антитело от Santa Cruz Biotechnology (sc-33741): Toll (d-300).Это было ранее подтверждено Khadilkar et al., 2017, и Lund, De Lotto and De Lotto, 2010. Мы добавили эти ссылки в подраздел «Карта рецепторов Toll в мозге Drosophila ».

      2) Подраздел «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в мозгу через MyD88», второй абзац: каковы доказательства того, что Myd88 [NP6394] достоверно сообщает о экспрессии MyD88?

      MyD88 [NP6394] представляет собой вставку P-элемента GAL4 чуть более чем на 500 п.н. выше стартового кодона MyD88 и, что важно, в пределах одного экзона 5 ’UTR (см. Www.flybase.org). Таким образом, поскольку вставка GAL4 находится внутри неинтронной мРНК, она обязательно представляет собой паттерн эндогенной экспрессии. Тем не менее, чтобы учесть озабоченность рецензента, мы также попробовали: (1) окрашивание довольно старой и крошечной аликвотой антител против MyD88, которую мы имели. К сожалению, это не дало надежного результата. (2) Мы создали линию GFP-MyD88 CRISPR и протестировали ее на мозге взрослого человека. К сожалению, это не дало надежного сигнала GFP, поскольку мы допустили ошибку в молекулярном дизайне.(3) Мы купили и протестировали линию трансгенома MyD88fTG Fosmid (Sarov et al., 2016 eLife ), которая должна была экспрессировать слитый белок MyD88-GFP в контексте эндогенных регуляторных последовательностей. Однако это не выявило никакого сигнала, и авторы предупредили, что не все их фосмиды успешны. В заключение, много усилий и денег было потрачено на решение этого вопроса, в то время как вставка NP6394-GAL4, скорее всего, обеспечивает точный профиль экспрессии MyD88 .Мы добавили объяснение того, почему MyD88 [NP6394] подходит для использования в подразделе «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      3) Подраздел «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге посредством MyD88», пятый абзац: тот факт, что потеря функции Toll-2 в MyD88-позитивных клетках вызвала потерю клеток, не означает, что Toll-2 поддерживает нейрональную выживание через канонический путь MyD88: это только один из возможных способов объяснить результаты.

      Мы уже опубликовали исчерпывающий механистический анализ, демонстрирующий, что рецепторы Toll способствуют выживанию клеток через MyD88 и гибели клеток через Sarm (Foldi et al., 2017, «Одна из 10 лучших статей 2017 года»). Более того, это эволюционно консервативно, поскольку у млекопитающих MyD88 способствует выживанию клеток и гибели клеток Sarm (Kim et al., 2007; Mukherjee et al., 2015). Таким образом, мы подумали, что здесь нет необходимости предоставлять доказательства того же типа или предоставлять биохимические доказательства того, что Toll-2 связывает MyD88 и передает сигналы через MyD88, как мы уже сделали это для Toll-6 и -7 (Foldi et al. al., 2017), а MyD88 — самый известный адаптер из всех платных и TLR. Наши данные согласуются с регуляцией выживаемости клеток с помощью Toll-2 через MyD88.На тот случай, если рецензент пропустил эту литературу, мы добавили разделы, поясняющие это, во Введении, Результатах и ​​Обсуждении.

      Мы показали, что потеря функции Toll-2 вызвала нейродегенерацию: она вызвала потерю нейронов (представлены на рис. 2G, H и рис. 3C-I), уменьшила выживаемость и продолжительность жизни мух (представленная на рис. 3 — приложение к рис. 1), нарушение поведения (анализ лазанья и арена Буридана, представленная на рис. 3 — приложение к рисунку 1С и рис. 3J-N) и вызывало дегенерацию нейритов и целых нейропилов (рис. 3С-I).

      Тем не менее, чтобы ответить на озабоченность рецензента и напрямую спросить, может ли Toll-2 регулировать выживаемость или гибель клеток, мы проверили, вызывает ли нокдаун Toll-2 в клетках MyD88 + апоптоз. Мы окрашивали мозги MyD88GAL4> UASToll-2RNAi с помощью маркера апоптоза анти-Dcp1 и автоматически подсчитывали клетки Dcp1 + в трехмерном виде по всему стеку (то есть не в проекциях) с помощью специально разработанного программного обеспечения DeadEasy. Апоптотические клетки удаляются очень быстро, и поэтому их легко пропустить.Поэтому мы протестировали куколку 1-го дня, когда большая часть гибели клеток происходит в нормальном мозге, а нейроны имеют большую потребность в поддержании жизни. Мы подсчитали апоптозные клетки в центральном мозге, так как в зрительных долях происходит так много гибели клеток, что DeadEasy не может точно подсчитать. Нокдаун Toll-2 в MDy88 клетках ( MyD88GAL4> UASToll-2RNAi ) усиливал апоптоз в центральном мозге. Предыдущие данные показали, что нокдаун Toll-2 RNAi вызвал потерю клеток MyD88 +, и теперь мы также показываем, что нокдаун MyD88 RNAi также вызывает потерю клеток MyD88 + (новый рисунок 2H).Вместе эти данные демонстрируют, что Toll-2 требуется для поддержания выживания клеток, экспрессирующих MyD88 .

      Эти новые данные теперь представлены на новом рисунке 2G, H. Мы также переписали текст, чтобы интерпретация точно отражала данные — подраздел «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в мозге».

      4) Подраздел «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге посредством MyD88», шестой абзац: фенотип мух MyD88 KO или KD следует сравнить с фенотипом мутантов Toll-2.

      Мы уже опубликовали, что потеря функции MyD88 у мутантов вызывает апоптоз и потерю нейронов в вентральном нервном канатике куколки (Foldi et al., 2017). Тем не менее, чтобы ответить на запрос рецензента, мы проверили, может ли MyD88-RNAi в нейронах, экспрессирующих MyD88 , вызывать потерю нейронов в куколке и мозге взрослого человека ( MyD88GAL4 x UAShistoneYFP, UASMyD88RNAi ) для сравнения с Данные Toll-2RNAi на рисунке 2H. Мы обнаружили, что MyD88-RNAi в куколке вызывает потерю клеток в центральном мозге, демонстрируя, что для поддержания выживания нейронов с помощью Toll-2 требуется MyD88.К взрослой стадии эффект нокдауна MyD88 был восстановлен, что позволяет предположить, что MyD88 также участвует в пролиферации клеток, что является предметом второй части статьи.

      Эти новые данные теперь представлены на рисунке 2H, а текст в подразделе «Toll-2 является нейрозащитным в головном мозге» изменен.

      5) Подраздел «Toll-2 может увеличивать количество клеток в развитии и во взрослом мозге», первый абзац: корреляция не является причиной, авторы не могут сделать вывод, что Toll-2 поддерживает выживание нейронов в центральном мозге посредством канонического пути MyD88. из этих экспериментов.

      Это критика, аналогичная критике в пункте (3). Чтобы ответить на критику этого рецензента и улучшить данные, а также интерпретацию, мы: (1) проверили, увеличивает ли потеря функции Toll-2 в клетках MyD88 + количество апоптотических клеток в центральном мозге куколки, окрашенных антибиотиками. -Dcp1. И мы обнаружили, что это так. (2) Показано, что нокдаун MyD88 RNAi приводит к потере клеток в кукольном мозге. (3) Удален дополнительный рисунок 4, который теперь является избыточным, поскольку приведенные выше данные прямо демонстрируют, что Toll-2 и MyD88 поддерживают выживание нейронов в куколке.Эти новые данные теперь представлены на новых рисунках 2G, H и изменениях текста в подразделе «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      6) Подраздел «Toll-сигнализация активна в мозге куколки и взрослого», заголовок: утверждение вводит в заблуждение, данные представляют только данные экспрессии для компонентов пути или для репортеров, которые не являются эксклюзивными для Toll-сигнализации.

      Теперь это было изменено на «Известные эффекторы передачи сигналов Toll распределяются в мозге развивающегося и взрослого человека»

      7) Подраздел «Передача сигналов Toll активна в мозге куколки и взрослого человека», пятый абзац: утверждения, касающиеся спинного и спинного мозга. Дифы крайне сбивают с толку.Что означает «ядерный диф и спинной»? Имеются в виду авторы коротких изоформ транскриптов, кодирующих белки с NLS?

      Различные изоформы Dorsal и Dif описаны в Zhou et al., 2015. Изоформы A, B, D, E и изоформы C, F в Flybase соответствуют изоформам A и B, соответственно, из Zhou et al., 2015. Здесь авторы описали изоформы Dorsal-A и Dif-A, которые содержат домен Rel-гомологии, узнавание сайта kB в ядре и сигнал ядерной локализации (NLS) на C-конце, тогда как Dorsal-B и Dif- B отсутствует NLS.Цитоплазматические изоформы B действуют в NMJ, рекрутируя рецепторы Glu (Heckscher et al. 2007 Neuron). Поскольку мы ранее показали, что поддержание выживания нейронов с помощью Tolls зависит от ядерной транслокации Dif и Dorsal (Foldi et al., 2017), чтобы функционировать как факторы транскрипции, управляющие экспрессией генов, мы были заинтересованы в визуализации локализации только ядерные изоформы. Спасибо за обратную связь, мы добавили краткое объяснение этого момента в подраздел «Известные эффекторы передачи сигналов Toll распределяются в развивающемся и взрослом мозге».

      8) Подраздел «Передача сигналов Toll активна в мозге куколки и взрослых особей», пятый абзац: эксперименты с использованием трансгенных мух с помеченными Dif и Dorsal. Известно, что белки NF-κB беспорядочно связываются с сайтами связывания Rel, поэтому после эктопической экспрессии Dif и Dorsal можно ожидать потери специфичности, и ее следует принимать во внимание при интерпретации результатов.

      Позвольте нам уточнить, поскольку может показаться, что рецензент упустил суть здесь.Действительно, трансгенные конструкции переносятся в Bacmids, поэтому меченые белки экспрессируются на уровнях дикого типа. Однако мы не исследовали фенотипические последствия их изменения уровней на транскрипцию с сайтов связывания NFkB на ДНК. Вместо этого мы только спросили, могут ли меченые белки попасть в ядро, для каких уровней или специфичности связывания как факторов транскрипции, в этом контексте, не имеет значения.

      9) Подраздел «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозгу куколки и взрослого человека посредством Wek», первый абзац: я не вижу данных на рисунках, показывающих присутствие Dorsal и Dif в ядре куколочного и взрослого мозга. .

      Похоже, что рецензент 1 пропустил эти данные. Эти данные представлены на представленном Рисунке 4 — приложении к рисунку 1I-L, на котором показаны круглые клетки GFP +, выявляющие ядерные изоформы Dorsal и Dif в кукольном мозге (Рисунок 4 — приложение к рисунку 1I, K), а также ядерное Dif также во взрослом мозге ( Рисунок 4 — приложение к рисунку 1J). Также были предоставлены изображения с большим увеличением (справа от всего мозга), показывающие отчетливый круглый ядерный сигнал.

      10) Рисунок 4E: трудно интерпретировать результаты этого эксперимента, не зная фенотипа, который может возникнуть в результате однократного лечения (т.е.е. Только KD JNK, только кактус, только OE PI3K).

      Теперь мы выполнили эти однолинейные тесты для UAS-JNK-RNAi, UAS-cactus-RNAi и UAS-PI3KCAAX . Даже если они не были запрошены, мы также добавили только UAS-wek и UAS-MyD88RNAi для завершения. Мы не делали этого для клеток Kenyon, так как они все равно не подвергались значительному влиянию комбинированных генотипов. Эти новые данные теперь представлены на рисунке 4E.

      11) Обсуждение, вероятно, слишком длинное и недостаточно целенаправленное.

      Нет проблем, теперь мы сократили его по сравнению с предыдущей версией. Однако с огромным увеличением данных после пересмотра это оказалось сложной задачей. Тем не менее, мы приложили значительные усилия, чтобы сохранить всю рукопись как можно более краткой.

      12) Условные обозначения к рисункам слишком короткие, часто их трудно понять неспециалистам.

      Нет проблем, мы их удлинили.Мы благодарим этого рецензента за его / ее положительную и восторженную оценку нашей работы, а также за очень полезные предложения, которые улучшили нашу рукопись.

      Рецензент № 2:

      […] В целом это довольно описательное исследование. На протяжении всей статьи автор часто делает выводы, не подтверждаемые фактическими данными. Плохое написание рукописи затрудняет логическое развитие статьи. Здесь я просто выделю несколько очевидных вопросов, касающихся строгости исследований (но в статье их гораздо больше).

      Мы благодарны рецензенту 2 за отзывы и конструктивную критику, которые помогли нам улучшить рукопись.

      Мы уважительно не согласны с этим рецензентом в том, что эта работа «в целом довольно описательная», поскольку из семи очень больших цифр и пяти дополнительных цифр, которые были представлены, большая часть данных относится к функциональному генетическому анализу (например, клеточные и поведенческие фенотипы потери и увеличения функции состояния и генетические тесты эпистаза), а не описания. Мы ценим поднятые обоснованные вопросы, которые мы рассмотрели следующим образом:

      1) В разделе результатов под названием «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в мозгу через MyD88» авторы заявили, что «поскольку MyD88 является адаптер Tolls, и он необходим для обеспечения выживания нейронов в других контекстах (Foldi, et al., 2017; Kim, et al., 2007), тот факт, что потеря функции Toll-2 в клетках MyD88 + вызывает потерю клеток, подразумевает, что Toll-2 поддерживает выживание нейронов посредством канонического пути MyD88 ». Просто демонстрируя, что нокдаун Toll-2 уменьшение количества клеток MyD88 + не оправдывает это утверждение. Как можно сделать вывод об участии MyD88 без фактического воздействия на активность MyD88?

      Мы уже опубликовали исчерпывающий механистический анализ того, как рецепторы Toll регулируют выживаемость клеток через MyD88 и гибель клеток через Sarm (Foldi et al., 2017, выбранный JCB как «Одна из 10 лучших статей 2017 года» и в Специальную коллекцию по клеточной нейробиологии 2018 года как «среди самых захватывающих открытий в клеточной нейробиологии»). Таким образом, мы подумали, что здесь нет необходимости предоставлять доказательства того же типа, и мы не считаем необходимым предоставлять биохимические доказательства того, что Toll-2 связывает MyD88 и передает сигналы через MyD88, как мы уже сделали это для Toll-6. и -7 (Foldi et al., 2017), и все дорожные сборы могут это сделать. Мы также уже опубликовали, что потеря функции MyD88 у мутантов вызывает апоптоз, поскольку это увеличивает частоту апоптотических клеток Dcp1 + и потерю нейронов в вентральном нервном канатике куколки (Foldi et al., 2017).

      Тем не менее, чтобы ответить на запрос рецензента, мы теперь манипулировали активностью MyD88, как было предложено. Мы проверили, влияет ли MyD88-RNAi в нейронах, экспрессирующих MyD88, количество нейронов ( MyD88GAL4 x UAShistoneYFP, UASMyD88RNAi ) для сравнения с данными Toll-2RNAi на рисунке 2H. Мы обнаружили, что MyD88-RNAi в куколке вызывает потерю клеток в центральном мозге. К взрослой стадии эффект нокдауна MyD88 был восстановлен, что позволяет предположить, что MyD88 также участвует в пролиферации 5 клеток, что является предметом второй части статьи.Эти данные демонстрируют, что MyD88 необходим для поддержания выживания клеток в кукольном мозге. Эти новые данные представлены на Рисунке 2H и изменениях текста в подразделе «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      Чтобы предоставить дополнительные доказательства, которые решают озабоченность рецензента 2, мы также проверили, вызывает ли потеря функции Toll-2 в клетках MyD88 + апоптоз, который может привести к потере клеток. Мы окрашивали мозги MyD88GAL4xUASToll-2RNAi апоптозным маркером анти-Dcp1 с последующим автоматическим подсчетом клеток в 3D во всех стопках конфокальных изображений (т.е.е. не в проекциях) с помощью программного обеспечения DeadEasy, которое мы разработали. Апоптотические клетки удаляются очень быстро (например, в течение 20 минут), и поэтому их легко пропустить. Поэтому мы протестировали куколку первого дня, так как это момент времени, когда большая часть гибели клеток происходит в нормальном мозге, и нейроны имеют большую потребность в поддержании жизни. Мы подсчитали апоптозные клетки в центральном мозге, так как в зрительных долях происходит так много гибели клеток, что DeadEasy не может точно подсчитать. Мы обнаружили, что нокдаун Toll-2 в MDy88 клетках ( MyD88GAL4> UASToll-2RNAi ) вызывал усиление апоптоза в центральном мозге.Это демонстрирует, что Toll-2 необходим для поддержания выживания клеток, экспрессирующих MyD88. Эти новые данные теперь представлены на новом рисунке 2G.

      Мы также переписали текст, чтобы интерпретация точно отражала данные — подраздел «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      2) В разделе результатов, озаглавленном «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозгу куколки и взрослого человека через Wek», фактические данные, подтверждающие это утверждение, были очень слабыми. Простого наблюдения, что сверхэкспрессия Wek вместе с MyD88 RNAi увеличивает количество клеток в центральном мозге, недостаточно, чтобы сделать такой вывод.Как можно сделать такой вывод, фактически не изучая требования Wek?

      Мы согласны с тем, что лучше всего тестировать также только Wek, а также только MyD88-RNAi. Таким образом, в ответ на этот обзор мы проверили:

      1) изменяет ли условная сверхэкспрессия только wek, ограниченная только взрослыми, количество клеток ( MyD88GAL4 UAShisYFP, tubGAL80ts x UAS wek ). Мы показываем на новом рисунке 4E, что количество ячеек увеличилось по сравнению с элементами управления.

      2) влияет ли условный нокдаун MyD88 только на взрослых людей на количество клеток ( MyD88GAL4 UAShisYFP, tubGAL80ts x UAS MyD88RNAi ) в мозге взрослого человека.Мы показываем на новом рисунке 4E, что количество ячеек увеличилось по сравнению с элементами управления.

      Мы тестировали только центральный мозг, а не KC, поскольку не было обнаружено значительного влияния на KC с комбинированными линиями. В целом, наши данные показывают, что как условное отключение MyD88 , так и сверхэкспрессия wek в мозге взрослого человека увеличивают количество клеток в мозге, и что оба вместе приводят к синергетическому дальнейшему увеличению количества клеток во взрослом мозге. Это согласуется с тем, что MyD88 способствует покою, а Wek индуцирует пролиферацию, противодействуя MyD88.

      Эти новые данные теперь представлены на Рисунке 4E и в подразделе «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозге куколки и взрослого».

      Мы также использовали эпистаз, чтобы проверить, спасает ли wek-knockdown увеличение числа клеток, вызванное сверхэкспрессией Toll-2, и это действительно так. Эти новые данные представлены на Рисунке 7F и в подразделе «Toll-2 способствует клеточному циклу в мозгу через Йорки».

      3) Это исследование опирается на одну линию РНКи для изучения функции различных Toll-подобных рецепторов.По крайней мере, еще одна линия РНКи должна быть протестирована, чтобы исключить возможность нецелевых эффектов.

      Мы использовали линию UAS-Toll-2-RNAi из складского центра Блумингтона: TRIP [HM05241]. Чтобы ответить на эту критику со стороны рецензента 2, мы:

      1) использовали вторую линию RNAi, нацеленную на Toll-2, из венского складского центра: VDRC36205. Теперь мы показываем, что нокдаун этой линией ( MyD88GAL4> UAS-Toll-2RNAi [36205] ) имел тот же эффект, что и ранее используемая линия TRIP, вызывая потерю клеток в центральном мозге.Мы не считали необходимым делать это также с Toll-2GAL4 в клетках Kenyon, так как никакие манипуляции с каким-либо одним геном в любом случае не вызывали там эффекта. Эти данные подтверждают, что нокдаун Toll-2 вызывает потерю клеток в центральном мозге, подтверждая, что Toll-2 необходим для поддержания выживания нейронов.

      Эти новые данные представлены на Рисунке 2H и изменениях текста в подразделе «Toll-2 оказывает нейрозащитное действие в головном мозге».

      2) Мы сократили несколько Toll с другими линиями RNAi до Toll-1, -2, -6 и -7 для рисунка 7, теперь называемого рисунком 8.Ранее мы использовали строки: Bloomington Stocks: UAS-Toll-1RNAi: y [1] v [1]; UAS Toll-1-RNAi [P.TRiP.JF10491]; UAS-Toll-2RNAi: y [1] sc * v [1]; P {TRiP.HM05241} attP2 / TM3, Sb1; и VDRC36205. UAS-Toll-6RNAi: y [1] v [1]; P {TRiP.HMS04251} attP2; UAS-Toll-7RNAi: y sc v; P {TRIP.HM05230} attP2; UAS-Toll-8RNAi: yv; UAS Toll-8-RNAi [P.TRiP.HM05005].

      Теперь мы также использовали линии: UAS Toll-1 RNAi [TRiP JF01276] (BSC), UAS Toll-2 RNAi [V36305] (VDRC), UAS Toll-2 RNAi [V44386] (VDRC), w; UAS Toll-6 RNAi [V928] (VDRC), w ;; UAS Toll-7 RNAi (NIG III) (KDRC), UAS Toll-8 RNAi [V27098] (VDRC).

      Общие выводы не изменились. То есть у Tolls есть повторяющиеся или перекрывающиеся функции в мозгу, и одновременное отключение нескольких Tolls ухудшает развитие мозга.

      Эти новые данные представлены на новых рисунках 8B, D, E и в подразделе «Платежи регулируют размер мозга в процессе развития и в критический период взрослого человека».

      4) Авторы используют вставки Gal4 в разные Tolls в качестве суррогата для своих выражений. Хотя это разумная отправная точка, такие закономерности должны быть подтверждены ортогональными методами, такими как окрашивание антител, гибридизация in situ или, как минимум, анализ генетического спасения.

      Автор обзора прав в том, что визуализация эндогенной мРНК или белка — лучший способ визуализировать, где экспрессируется ген. Мы использовали антитела против Toll-1, поскольку они коммерчески доступны (Santa Cruz Biotechnology (sc-33741) toll (d-300)) и были подтверждены другими (Khadilkar et al., 2017, и Lund, De Lotto и De Lotto, 2010).

      Однако получение хороших антител технически непросто, это дорого, и ни один из этих методов не обеспечивает достаточно высокого разрешения для визуализации и идентификации экспрессирующих клеток.Поэтому мы благодарны редактору за то, что он освободил нас от экспериментальной реакции на эту критику. Антитела к Toll-6 и Toll-7 были созданы в прошлом как нашей группой, так и другими (McIlroy et al., 2013; Ward et al. 2015 Neuron), но они зашумлены, а разрешение клеток было низким, что препятствовало идентификации. экспрессирующих клеток. Это может быть связано с тем, что существует 9 Toll, и может быть неспецифическое связывание антител с множеством Toll. Таким образом, мы решили не пытаться генерировать больше антител ко всем Tolls, поскольку были обеспокоены тем, что результат может быть ненадежным, непредсказуемым и ограниченным в использовании.Драйверы GAL4 неоднократно зарекомендовали себя как лучший способ (например, с привязанными к мембране репортерами и клонами, такими как клоны FlyBow и MCFO) для визуализации и идентификации клеток, и были использованы для сопоставления полных цепей как в мозге личинок, так и в мозге взрослых особей. Коннектомы для электронной микроскопии (Zheng et al.2018 Cell; Eichler 2017 Nature и др.). Ключевым моментом является то, где размещается GAL4. Мы сгенерировали репортерные драйверные линии GAL4, которые воспроизводят пространственный паттерн экспрессии этих генов, с помощью:

      1) RMCE из вставок MIMIC в безинтронную кодирующую область Toll-3, Toll-6, Toll-7 : поскольку эти гены имеют без интронов, образующиеся в результате вставки GAL4 обязательно управляют профилями их эндогенной экспрессии.

      2) Доступны мухи Tollo MD806 , несущие вставку GAL4 всего на 180 п.н. перед стартовым кодоном Toll-8 в пределах 500 п.н. 5’UTR Toll-8 . Поскольку вставка находится внутри транскрибируемой мРНК, это означает, что GAL4 обязательно будет управлять паттерном эндогенной экспрессии.

      3) Подделки CRISPR / Cas9 для Toll-2, Toll-4 и Toll-5 , где GAL4 был размещен непосредственно рядом с 5 ’начальным кодоном.Таким образом, GAL4 будет экспрессироваться как эндогенные гены.

      В заключение, у нас есть надежные доказательства того, что все использованные репортеры Toll воспроизводили свои эндогенные пространственные профили, демонстрируя, что эти инструменты подходят.

      Чтобы ответить этому рецензенту, мы улучшили пояснение в подразделе «Карта рецепторов Toll в мозге Drosophila ». Мы благодарны этому рецензенту за конструктивную критику, которая помогла улучшить нашу работу.

      Рецензент № 3:

      Настоящая рукопись Ли и др.исследует функцию членов семейства Toll в мозге взрослого человека Drosophila . Авторы показывают, что несколько членов семейства Toll обнаруживают частично перекрывающиеся паттерны экспрессии в различных областях мозга. Избыточная экспрессия одного из них (Toll-2) вызывает увеличение числа нейронов в центральном мозге и продолговатом мозге. Одновременное истощение нескольких членов семьи Толля, наоборот, уменьшает количество клеток в куколочном мозге. Авт. Предполагают, что члены семейства Toll действуют через Weckle и Yki, чтобы способствовать нейрогенезу взрослых путем деления популяции покоящихся предшественников.Хотя это потенциально захватывающее открытие, которое значительно улучшит наше понимание пластичности мозга взрослых, есть несколько областей, которые требуют улучшения, прежде чем рукопись может быть принята к публикации, как подробно описано ниже.

      1) Фенотипы с потерей функции.

      Истощение Toll-2 в мозге взрослого человека не имеет фенотип, противоположный гиперэкспрессии Toll-2 (рис. 4A). Фактически, оба, по-видимому, увеличивают количество клеток, что трудно объяснить. Авторы предполагают, что Tolls могут действовать избыточно во взрослом мозге, что может объяснить, почему истощение Toll-2 не снижает количество нейронов.Они истощают несколько Tolls вместе без какого-либо временного контроля, вызывая летальность куколки и уменьшение размера мозга (рис. 7). Однако, поскольку раннее истощение Toll вызывает широко распространенные фенотипы развития, совсем не ясно, имеют ли результаты, представленные на фиг. 7, какое-либо отношение к фенотипам сверхэкспрессии Toll-2 взрослых, которые наблюдают авторы. Авторы должны истощить различные комбинации Toll в мозге взрослых с помощью tub-GAL80ts, как они это делают на других рисунках, и посмотреть на их влияние на количество клеток, их гибель и пролиферацию.Если их гипотеза верна, истощение Toll в мозге взрослого человека должно поставить под угрозу рост в критический период.

      С уважением к этому рецензенту, мы согласны с тем, что все это интересно, но позвольте нам отметить, что это очень сложные и трудоемкие эксперименты, и эта рукопись уже потребовала 5 лет непрерывной, ежедневной, очень тяжелой работы. , в том числе 5 месяцев только на эту доработку. Работа со всеми этими пунктами займет гораздо больше времени, чем требуется для пересмотра.

      Мы благодарны этому рецензенту за это предложение, в результате которого были получены очень интересные данные. Технически было невозможно проверить эффект трех Toll-RNAis только в критический период из-за ограничений генетики. Таким образом, мы условно сбили два пункта сбора за один раз (новые данные приведены на Рисунке 8 — приложение к рисунку 1): Toll-2, -6 и Toll-6, -7 . С tubGAL80 ts , MyD88GAL4> hisYFP, Toll-2, Toll6RNAi это привело к увеличению числа клеток в центральном мозге.Toll-6 может быть проапоптотическим (Foldi et al., 2017), что вносит вклад в этот генотип. Нокдаун Toll-6, -7 с помощью tubGAL80 ts , Toll2pTVGAL4> Toll-6, Toll-7RNAi не повлиял на размер мозга, но нокдаун Toll-2, Toll-6RNAi повлиял на большинство мозгов были меньше контрольных, но 25% были больше. Вариабельность этих фенотипов указывает на лежащие в основе сложные компенсаторные взаимодействия между множественными Tolls. Ячейки Kenyon, которые сопротивлялись множественным манипуляциям с Toll-2, пострадали от нокдауна нескольких Tolls.Дальнейшее тестирование клеток Кеньона было важным, поскольку Гейзенберг, Барт и Технау ранее показали, что грибовидные тела демонстрируют структурную пластичность, зависящую от опыта. Таким образом, мы протестировали tubGAL80ts, Toll2GAL4> UAShistoneYFP, UAS-Toll-2RNAi, UAS-Toll-6RNAi и UAS-Toll-7RNAi, UAS-Toll-6RNAi дублируются на фоне гетерозиготного мутанта Toll-2 (Toll-2GAL4 является мутантом). Это показало, что нокдаун нескольких Tolls в критический период взрослых дезорганизует только кластеры KC, которые располагаются глубже по оси A / P и количеству клеток Kenyon.Интересно, что нокдаун Toll-6, -7 привел к увеличению KC. Эти данные показывают, что дорожные сборы имеют дублирующие функции в KC также в критический период для взрослых, и что разные сборы по-разному влияют на KC. Эти новые данные показаны на новых рисунках 8F, G, H и в подразделе «Платежи регулируют размер мозга в процессе развития и в критический период взрослого человека».

      Следуя мнению этого рецензента, мы также проверили, влияет ли условное усиление функции Toll-2 и его последующих эффекторов в критический период взрослого только на размер мозга.И мы обнаружили, что это действительно так: сверхэкспрессия Toll-2, MyD88RNAi или wek увеличивала размер мозга у взрослых. Эти замечательные результаты предоставили убедительные доказательства того, что сигнальная система Toll регулирует структурную пластичность мозга у взрослых. Эти новые данные представлены на Рисунке 8I, K.

      Мы не можем объяснить все фенотипы и всю встреченную изменчивость, но это связано с очень четким сообщением. Толлы регулируют множество сигнальных путей, которые модулируют выживание, смерть, покой и пролиферацию клеток.У каждого платного маршрута есть разные предпочтения для этих путей. Более того, поскольку их паттерны экспрессии перекрываются, и потеря функции в одном Toll может повлиять на реакцию других, диапазон потенциальных результатов очень сложен. См. Обсуждение.

      2) Взрослые нейрогенные предшественники

      Авторы предполагают, что они идентифицировали популяцию потенциально пролиферативной популяции взрослых предшественников MyD88 + / Dpn +. Чтобы подтвердить это открытие, они должны, по крайней мере, напрямую показать, что эти клетки MyD88 / Dpn могут пролиферировать с использованием окрашивания Ph4 / EdU в мозге взрослого человека при экспрессии Toll-2 с соответствующим совместным окрашиванием.

      Взрослые предки были ранее обнаружены Ито (Kato et al., 2009), Hariharan (Siegrist et al., 2010), Морено (Fernandez-Hernandez et al., 2013 Current Biology) и Коэном (Foo et al. , 2017) лаб. Наши данные согласуются с приведенным выше и показывают, что взрослые предшественники в основном остаются в покое с помощью передачи сигналов MyD88, а усиление функции Toll-2 через Wek может перекрывать MyD88 и заставлять их делиться.

      EdU / BrdU выявляет клетки в S-фазе, и мы уже показали, что избыточная экспрессия Toll-2 только у взрослых с тепловым шоком GAL4 увеличивает количество клеток PCNA-GFP + в S-фазе.Чтобы улучшить представление этих данных, мы добавили подсчет клеток PCNA-GFP +, эти данные представлены на новом рисунке 5E. Это показывает, что сверхэкспрессия Toll-2 в мозге взрослого человека увеличивает частоту циклического перехода клеток от фазы G1 к фазе S.

      ph4 выявляет клетки в митозе, который происходит очень быстро и, следовательно, трудно обнаружить. Для пересмотра мы попробовали анти-ph4, но не получили надежных данных. Мы также попытаемся создать клоны Toll-2 с усилением функции Twin-Spot MARCM, которые, в отличие от стандартных клонов MRCM, представленных на фиг. 5B, C, также выявляли бы материнскую клетку-предшественницу.Однако этот метод не работал так хорошо, как ожидалось, поскольку GFP / RFP-РНК не выключали экспрессию репортеров, и полученные клоны имели смешанные сигналы. Так что эти результаты пришлось отбросить. Чтобы преодолеть эти проблемы, мы использовали еще два альтернативных подхода:

      i) Мы использовали слитый белок Stg-GFP для визуализации клеток в переходе G2 / M: String (Stg) активируется CyclinB и Yorkie для инициирования перехода G2-M и вступление в митоз. Таким образом, слитый белок Stg-GFP выявляет клетки, которые находятся в G2 и собираются делиться.Мы обнаружили много клеток Stg-GFP + как в контрольном мозге взрослых, так и в тех, которые сверхэкспрессируют Toll-2. Эти новые данные представлены на новом рисунке 5I и в подразделе «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозге куколки и взрослого человека».

      ii) Мы использовали Fly-FUCCI, который маркирует только циклические ячейки. FUCCI выявляет клетки в фазах G1, G1 / S, G2 и G2 / M, но не клетки в G0 (т.е. вышедшие из клеточного цикла). Он управляет экспрессией ядерных слитых белков с факторами клеточного цикла E2F и циклином-B.Таким образом, degronE2F-GFP визуализируется зеленым цветом в точках G1, G2 и M и разрушается, когда клетки входят в S-фазу; а degron-CyclinB-RFP визуализируется красным цветом в точках S, G2 и M, и он разрушается, когда клетки попадают в G1. Таким образом, потеря сигнала / ячеек GFP указывает на переход от G1 к S, потеря сигнала / ячеек RFP указывает на переход от M к G1 (т.е. клетки только что вышли из митоза). В комбинации 9 клетки, которые имеют красный + зеленый цвет, находятся в G2 или M, клетки, которые являются только зелеными, либо только завершают деление клеток, либо находятся в G1, а клетки, которые только красные, находятся в фазе S.Мы сверхэкспрессировали Toll-2 и FUCCI только у взрослых, используя Toll-2 GAL4, tubGAL80ts x UAS-FUCCI по сравнению с UAS-FUCCI, UAS-Toll-2 , и проанализировали клетки в G1 (зеленый) , Фазы S (красный), G2 и M (зеленый и красный). В контрольном мозге взрослого человека были клетки в фазах G1, S и G2. Чрезмерная экспрессия Toll-2 приводила к увеличению количества клеток в каждой из этих фаз, что означает, что Toll-2 индуцирует клеточный цикл. Эти новые данные представлены на новом рисунке 6A-D и в подразделе «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозге куколки и взрослого человека».

      iii) Мы визуализировали клетки MyD88 + с FUCCI и анти-Dpn. Однако, поскольку мы уже показали, что большинство предшественников Dpn + во взрослом мозге были MyD88 +, мы окрашивали мозг как FUCCI, так и Dpn. Мы обнаружили, что при сверхэкспрессии Toll-2 большинство клеток Dpn + находились в G1 (т.е. GFP + RFP-), что означает, что они либо только что делились, либо находились в состоянии покоя в G1, а некоторые находились либо в S-фазе, либо в G2 / M. Эти новые данные представлены на новом рисунке 6K и в вышеупомянутом подразделе.

      3) Сигнализация в нисходящем направлении.

      Эта часть рукописи, в частности связь с Yki, нуждается в усилении.

      — Рисунок 6K: элемент управления, в котором истощается только Yki, отсутствует и должен быть предоставлен. Возможно, спасение, которое наблюдают авторы, — это промежуточный фенотип между экспрессией Toll-2 и истощением Yki.

      Мы согласны, теперь мы предоставляем эти новые данные ( MyD88GAL4, UAShisYFP, tubGAL80ts x UAS-yki-RNAi ) на новых рисунках 7E, E ‘и в подразделе «Toll-2 способствует клеточному циклу в мозгу через Yorkie. ».

      — Чтобы убедительно связать Yki с передачей сигналов Toll-2, авт. Должны проверить, может ли избыточная экспрессия Toll-2 активировать регуляцию репортеров Yki, таких как DIAP1-GFP или ex-LacZ, и / или способствовать проникновению в ядро ​​Yki.

      Мы попытались использовать следующие подходы:

      a) Мы проверили, способствует ли Toll-2 экспрессии репортеров гена-мишени Yki ex-lacZ и diap1-lacZ (что ближе к эндогенной экспрессии diap1, чем diap1-GFP ), в Toll-2GAL4, tubGAL80ts x ex-lacZ; UASToll-2 и Toll-2GAL4, tubGAL80ts x UASToll-2; diap1-lacZ с окрашиванием против βgal.Однако наблюдалась огромная перманентность lacZ, и практически все клетки в головном мозге были βgal +, также в контроле. Мы пробовали несколько протоколов, чтобы попытаться уничтожить lacZ с помощью тепла, но это не сработало. Так что этот эксперимент был технически невыполнимым.

      Вместо этого мы визуализировали Stg-GFP, который также является целью йорков — как в контроле, так и при избыточной экспрессии Toll-2. Эти новые данные представлены на новом рисунке 5I и в подразделе «Toll-2 может способствовать пролиферации клеток в мозге куколки и взрослого человека».

      b) Мы проверили, способствует ли Toll-2 проникновению в ядро ​​Yki, визуализированного с помощью антител против Yki, в Toll-2GAL4 tubGAL80ts x UASToll-2 и контрольном мозге дикого типа. Мы запросили антитела против Yki в лабораториях Duojia Pan, Kieran Harvey, Iswar Hariharan, Nic Tapon и Kenneth Irvine и получили две аликвоты против Yki, независимо созданные Duojia Pan и Ken Irvine. Оба антитела были протестированы в ЦНС личинок и куколок в качестве положительного контроля. К сожалению, в наших руках ядерный сигнал был недостаточно хорошим относительно фона / цитоплазмы в положительных контролях, чтобы предоставить надежные данные для ЦНС.Таким образом, этот эксперимент тоже был технически невыполнимым.

      c) Мы проверили, «способствует ли Toll-2 проникновению Yki-GFP в ядро» в мозге Toll-2GAL4, tubGAL80ts x Yki-GFP, UASToll-2 . Для этого мы получили два независимо созданных запаса слитого белка Yki-GFP от Nic Tapon и Harvey Kiran. Это сработало. Мы обнаружили 10 обильных клеток Yki-GFP + в нормальном мозге в контроле. Мы также обнаружили изменение в распределении клеток Yki-GFP + в головном мозге со сверхэкспрессией Toll-2.Эти клетки было трудно подсчитать по всему мозгу отчасти потому, что клеток было много, а отчасти потому, что автоматический подсчет с помощью DeadEasy был невозможен из-за широких областей с цитоплазматическим сигналом. Таким образом, мы подсчитали клетки Yki-GFP + вручную в трех различных областях интереса (ROI): мозговом веществе зрительной доли, субэзофагальном ганглии (SOG) и переднем верхнем левом углу центрального мозга. Данные показали, что: (1) в нормальном мозге взрослого человека есть клетки в G2-M; (2) и эта сверхэкспрессия Toll-2 вызвала либо бимодальное распределение — в некоторых мозгах было меньше клеток, в некоторых — с большим количеством клеток, чем в контроле, — либо увеличение количества клеток с ядерным Yki.Транспортировка Yki очень динамична, и клетки перемещаются в ядро ​​и из него (см. Manning et al., 2018. По мере цикла клеток и перехода между фазами (например, G2-M в G1 или G0) они могут перемещать Yki из ядра. ядра или даже подавляют его. Таким образом, эти данные указывают на то, что Toll-2 стимулирует клеточный цикл. Эти новые данные представлены на новом рисунке 7A-D и в подразделе «Toll-2 способствует клеточному циклу в мозге посредством Yorkie »

      — На рисунке 6K авторы делают вывод о сигнальном пути, в котором Weckle и JNK способствуют активности Yki ниже по течению от Toll-2.Если они хотят доказать это, они должны исследовать гены-мишени Yki / ядерную локализацию при экспрессии Toll-2 с истощением Weckle / JNK и без него.

      Ранее мы публиковали, что Wek функционирует ниже Tolls и выше JNK в контексте содействия апоптозу (Foldi et al., 2017), а другие ранее опубликовали, что JNK функционирует выше Yki (Katsukawa et al., 2018 ). Мы также ранее опубликовали, что Wek и MyD88 являются ключевыми внутриклеточными адаптерами Toll, которые могут колебаться между различными клеточными исходами ниже Tolls (Foldi et al., 2017). Таким образом, ключевой ген для тестирования — это wek, а не JNK.

      Эксперименты по эпистазу, предложенные рецензентом 3, были бы следующими: MyD88GAL4, tubGAL80ts мух, скрещенных с UAS Toll-2, UAS wek-RNAi и визуализация ядерного Yki с антителами против Yki, плюс контроль. Мы пробовали это. Однако антитела против Yki не работали, см. Выше, поэтому это невозможно было сделать. Введение Yki-GFP в указанные выше генотипы потребовало бы создания рекомбинантов плюс 2 комбинации хромосом nd и 3 rd , плюс затем эксперимент требует разведения при 18 ° C, что делает генетику только для этого эксперимента продолжительностью 6 месяцев — плюс время, необходимое для проведения эксперимента.Это было непропорционально для пересмотра.

      В качестве альтернативного подхода мы проверили, помогает ли нокдаун wek, как и yki-RNAi, также увеличить количество клеток, вызванное усилением функции Toll-2: MyD88GAL4 UAShisYFP, tubGAL80ts x UAS Toll-2, UAS wek -РНКи . И действительно, это так: нокдаун yki или wek спасает увеличение числа клеток, вызванное сверхэкспрессией Toll-2. Эти данные показали, что и Yki, и Wek функционируют ниже по течению от Toll-2, чтобы регулировать количество клеток в критический период взрослых.Эти новые данные представлены на новых рисунках 7E, E ’и в подразделе« Toll-2 способствует клеточному циклу в мозгу через йорков ».

      [Примечание редактора: далее следует ответ авторов на второй раунд обзора.]

      […] 1) Сверхэкспрессия Toll-2 явно увеличивает количество клеток, но истощение Tolls вызывает сложные фенотипы, что делает интерпретацию проблемных данных. Авторы по-прежнему заявляют в Резюме, что «Toll-2, потеря функции вызвала гибель клеток и нейродегенерацию», но, на мой взгляд, это вводит в заблуждение, потому что, как я указывал в моем первоначальном обзоре, эти ЦНС сильно нарушены, и это не так. ясно, что вызывает гибель клеток.Авторы предоставили новые данные о временно ограниченном отключении Toll, но результаты по-прежнему довольно запутанные, и такие утверждения, как «Параметры сигнализации могут измениться со временем, но как это происходит, не ясно». не особо полезны. Я понимаю, что авторы провели много экспериментов, чтобы решить эту проблему, но я бы посоветовал им быть более осторожными в своих интерпретациях и ясно указать в Обсуждении, что все может быть не так просто, как показывает эксперимент с усилением функции Toll-2. предложить.

      Мы благодарим рецензентов за их отзывы, так как это помогает нам улучшить нашу рукопись. Теперь мы отредактировали текст, следуя рекомендации быть более осторожными в интерпретациях и подчеркнув сложность исходов междугородной сигнализации в Обсуждении.

      Позвольте мне обсудить, что в заявлении выше есть отдельные вопросы.

      1) «истощение Tolls вызывает сложные фенотипы, что делает интерпретацию данных проблематичной»…. «Эти ЦНС сильно повреждены, и неясно, что вызывает гибель клеток».

      Это предложение неоднозначно, и нам интересно, ссылается ли рецензент на нокдаун нескольких Tolls на рисунке 8, что уменьшило размер мозга. Фенотип множественного нокдауна Toll , скорее всего, является результатом снижения выживаемости клеток и уменьшения пролиферации клеток на протяжении всего развития. Мы предоставляем все больше доказательств того, что Toll-2 способствует пролиферации клеток (например, новые рисунки 6 и 7). Вопрос о гибели клеток рассматривается ниже.

      Чтобы прояснить моменты, сделанные в отношении множественного фенотипа Toll , мы изменили текст в Результатах и ​​переписали Обсуждение.

      2) «Авторы до сих пор заявляют в Резюме, что« Toll-2, потеря функции вызвала гибель клеток и нейродегенерацию », но, на мой взгляд, это вводит в заблуждение, потому что, как я указывал в моем первоначальном обзоре, эти ЦНС в значительной степени нарушена, и неясно, что вызывает гибель клеток ».

      Рецензент сомневается в интерпретации того, что потеря функции Toll-2 вызвала гибель клеток и нейродегенерацию, потому что «истощение Tolls» приводит к «серьезным нарушениям и неясно, что вызывает гибель клеток».

      В ответ на запросы обозревателей для исправленной версии мы предоставили доказательства того, что потеря функции Toll-2 вызывает апоптоз, который был визуализирован с помощью Dcp1 (рис. 2G). Это продемонстрировало, что потеря Toll-2 вызывает гибель клеток. Мы также предоставили дополнительные доказательства в пересмотренной версии, что нокдаун Toll-2 с использованием нескольких РНК, а также нокдаун MyD88-RNAi , оба вызывали потерю клеток (рис. 2H), фактически, потерю клеток MyD88 +. Таким образом, потеря функции Toll-2 через MyD88 индуцировала апоптоз и потерю клеток.Мы уже опубликовали исчерпывающий механистический анализ, демонстрирующий, что рецепторы Toll способствуют выживанию клеток через MyD88 и гибели клеток через Sarm (Foldi et al., 2017 «Одна из 10 лучших статей 2017 года»). Более того, это эволюционно консервативно, поскольку у млекопитающих MyD88 способствует выживанию клеток и гибели клеток Sarm (Kim et al., 2007; Mukherjee et al., 2015). В пересмотренной версии мы представили новые доказательства того, что усиление пути MyD88, способствующего выживанию, путем нокаутации ингибитора NFκB Cactus или проапоптотического JNK, увеличивает количество клеток (рис. 4E).Это продемонстрировало, что передача сигналов Toll (s) через путь MyD88 поддерживает выживание нейронов в головном мозге.

      Мы также показали, что Toll-2 не проапоптотический, поскольку сверхэкспрессия Toll-2 не уменьшала количество клеток.

      Мы также показали, что Toll-2 вызывает нейродегенерацию. Toll-2 мутантные клоны MARCM приводили не только к массивной потере клеток, но также к атрофии аксонов и неправильной маршрутизации, а также к потере дендритов в оставшихся клетках (рис. 3A-G). Мы показали, что мутанты с потерей функции Toll-2 уменьшили продолжительность жизни, нарушили лазание и нарушили локомоцию — стандартные поведенческие доказательства нейродегенерации, используемые сообществом Drosophila .

      Таким образом, мы продемонстрировали, что потеря функции Toll-2 вызывала апоптоз, вызывала потерю нейронов, вызывала атрофию и неправильную маршрутизацию нейритов, нарушение долголетия и поведения. Это свидетельство того, что потеря функции Toll-2 вызывает нейродегенерацию. Мы продемонстрировали, что потерянные нейроны были MyD88 +, что потеря функции MyD88 и также вызвала потерю нейронов MyD88 +, и что количество нейронов можно восстановить, включив передачу сигналов MyD88. Таким образом, это продемонстрировало, что механизм, лежащий в основе регуляции выживаемости клеток в головном мозге, был таким же, как описано ранее для куколки (см. Foldi et al., 2017).

      В ответ на этот рецензент, чтобы прояснить вопросы, касающиеся выживаемости клеток, гибели клеток и нейродегенерации, мы изменили текст в разделе «Результаты» и переписали обсуждение.

      3) «Авторы предоставили новые данные о временно ограниченном отключении платных услуг, но результаты по-прежнему довольно запутанные, и такие утверждения, как« Параметры сигнализации могут измениться со временем, но как это происходит, не ясно ». не особенно полезны… .. четко укажите в Обсуждении, что все может быть не так просто, как можно было бы предположить из экспериментов по усилению функции Toll-2.

      Действительно, мы предоставили доказательства того, что условное нокдаун Toll-2 у взрослых может вызвать компенсаторный ответ, приводящий к сложному фенотипу, и что Tolls также имеют избыточные функции, например, нокдаун Toll-2. сам по себе не повлиял на клетки Кеньона, тогда как нокдаун 2 или более Tolls повлиял. Например, в первоначальной версии мы заявили: «До сих пор данные соответствовали тому, что Toll-2 поддерживал выживание нейронов через канонический путь MyD88 в мозге.Однако несколько Tolls могут регулировать этот путь, и Tolls также могут способствовать апоптозу через неканонические сигнальные пути (Foldi et al., 2017), таким образом, изменение уровней Toll-2 может вызывать компенсацию другими Toll, усугубляя фенотипы ». В пересмотренной версии мы представили новые доказательства того, что как избыточность, так и компенсация вносят вклад в фенотипы, поскольку условное нокдаун двух Tolls за один раз изменило количество клеток, но фенотипы различались при различных комбинациях Tolls (Рисунок 8F).Это означало, что каждый Toll может вызывать различные результаты (как мы предложили в Foldi et al., 2017), и нокдаун одного Toll может вызвать компенсаторную реакцию со стороны другого Toll , и не обязательно в том же направлении ( Рисунок 8F). Действительно, сигнализация с помощью системы взимания дорожных сборов сложна.

      Чтобы прояснить вопросы, касающиеся избыточности и компенсации, мы уточнили текст в разделах «Результаты» и «Обсуждение».

      В заключение, чтобы ответить на озабоченность этого рецензента, мы: (1) отредактировали реферат; (2) отредактировал текст в разделе «Результаты и обсуждение».

      Мы благодарим этого рецензента за его отзыв и надеемся, что он удовлетворен нашими улучшениями в рукописи.

      2) «Активация Yki по платным дорогам. Авторы снова провели больше экспериментов, но, как они указывают, как увеличение ядерной локализации Yki-GFP, так и увеличение stg-GFP может просто происходить в результате увеличения клеточного цикла. В отсутствие каких-либо данных о мишенях Yki, не связанных с клеточным циклом, и какого-либо четкого молекулярного механизма, связывающего Yki с Toll-2, я нахожу такие утверждения, как «Toll-2 индуцировал цикл взрослых клеток-предшественников по новому пути, зависимому от Векля и Йорки» вводить в заблуждение.Я бы посоветовал авторам быть более осторожными и четко заявить, что активация Yki может быть косвенным следствием пролиферации клеток, индуцированной Toll-2. Они могут сказать, что может существовать сигнальный путь, связывающий Toll-2 с Yki, но это потребует дальнейшего изучения в будущем ».

      Рецензент утверждает, что новые данные Yki-GFP, предоставленные для этой пересмотренной версии — вместе с ранее предоставленными данными Stg-GFP — являются свидетельством пролиферации клеток, но не обязательно в результате прямой активации Toll-2 Yki через Wek.Поскольку Stg необходим для пролиферации клеток и является мишенью для Yki, предположительно автор обзора имеет в виду, что триггер пролиферации клеток, индуцированный Toll-2, может находиться выше по течению. Позвольте мне прокомментировать вышеперечисленное.

      Мы рады, что этот рецензент считает, что Stg (цель Yki) и новые данные Yki (Рисунок 7) являются удовлетворительным доказательством клеточного цикла, индуцированного Toll-2.

      Прямая связь передачи сигналов Toll с Yki уже была опубликована другими исследователями как в контексте иммунитета, так и в контексте клеточной конкуренции (Liu et al., 2016; Кацукава и др., 2018). Таким образом, было бы разумно предположить, что Toll-2 может в некоторых контекстах также использовать те же маршруты, что и Toll-1.

      Мы согласны с этим рецензентом, что наши данные не позволяют нам утверждать, что Toll-2 активирует Wek, который активирует Yki, и что эти три фактора связаны линейным путем. Однако мы предоставили генетические доказательства эпистаза, что Yki функционирует ниже Toll-2, поскольку нокдаун yki-RNAi спасает увеличение числа клеток, вызванное сверхэкспрессией Toll-2 .В пересмотренной версии мы представили новые доказательства того, что Wek также функционирует ниже по течению от Toll-2, поскольку нокдаун wek-RNAi спасает увеличение числа клеток, вызванное сверхэкспрессией Toll-2 . Что мы не тестировали и не показывали, так это то, находится ли Wek выше Yki и связаны ли Toll-2, Wek и Yki линейным родством в одном и том же пути.

      Таким образом, чтобы ответить на эту критику со стороны этого рецензента и улучшить интерпретацию наших данных, в то же время точно представляя доказательства, мы сейчас: (1) отредактировали реферат; (2) переработал текст в «Результаты и обсуждение»; (3) и исправленный рисунок 9C, где мы теперь показываем три возможных альтернативы: что Wek вызывает распространение независимо от Yki; что Wek активирует Yki неизвестным пока механизмом; или что Wek активирует Yki через JNK, как сообщалось ранее (Foldi et al., 2017), а также об активации Yki JNK (Katsukawa et al., 2018).

       ---
      количество: 1
      Страница 1
      запрос: c08f11.3
      полученные результаты:
        -
          аллель:
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955229
              этикетка: gk565258
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955221
              этикетка: gk864947
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955212
              этикетка: gk814912
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01499493
              этикетка: gk963547
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01499952
              этикетка: gk964111
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955216
              этикетка: gk314055
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955226
              этикетка: gk323833
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01499951
              этикетка: gk964110
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01482627
              этикетка: gk946887
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00440050
              этикетка: gk216807
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955230
              этикетка: gk588918
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00263127
              этикетка: ttTi37956
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955213
              этикетка: gk784238
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955217
              этикетка: gk554256
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955218
              этикетка: gk521820
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01499925
              этикетка: gk964078
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955223
              этикетка: gk513769
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955220
              этикетка: gk349098
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955224
              этикетка: gk897860
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955219
              этикетка: gk929328
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955222
              этикетка: gk833493
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955210
              этикетка: gk584553
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955215
              этикетка: gk420042
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00263846
              этикетка: ttTi40619
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955228
              этикетка: gk396488
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01482626
              этикетка: gk946886
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00440048
              этикетка: gk216805
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955214
              этикетка: gk9
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955227
              этикетка: gk348514
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955209
              этикетка: gk687657
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955211
              этикетка: gk851694
            -
              класс: вариация
              id: WBVar02135003
              этикетка: h7264
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00955225
              этикетка: gk415698
            -
              класс: вариация
              id: WBVar00440049
              этикетка: gk216806
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01498996
              этикетка: gk962765
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01499492
              этикетка: gk963546
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01500245
              этикетка: gk964500
            -
              класс: вариация
              id: WBVar01482625
              этикетка: gk946885
          мертв: !! perl / скаляр: JSON :: PP :: Boolean 0
          описание: Обогащен в кишечнике на основе исследований РНК-секвенирования.На него влияют несколько генов, включая daf-16; даф-2; и glp-1 на основе микрочипа; РНК-seq; и исследования мозаичных массивов. Воздействует на восемь химикатов, включая хлорид ртути; Туникамицин; и миансерин на основе исследований микрочипов и РНК-секвенирования.
          этикетка: C08F11.3
          legacy_description: ~
          merged_into: ~
          название:
            класс: ген
            выделять:
              метка:
                -  C08F11.3 
              Другие названия:
                -  C08F11.3 
                -  C08F11.3 
            id: WBGene00007452
            этикетка: C08F11.3
            Другие названия:
              - C08F11.3
              - CELE_C08F11.3
              - C08F11.3
              - C08F11.3.1
              - CE44569
            таксономия: c_elegans
          Другие названия:
            - C08F11.3
            - CELE_C08F11.3
            - C08F11.3
            - C08F11.3.1
            - CE44569
          page_type: ген
          разновидность:
            ключ: c_elegans
            название: Caenorhabditis elegans
          таксономия:
            род: Caenorhabditis
            id: c_elegans
            виды: elegans
          wbid: WBGene00007452
      виды: ~
      тип: ген
      uri: поиск / ген / c08f11.3
       

      Конденсаторы, электрические конденсаторы, конденсаторы двигателя

      Конденсаторы используются во многих цепях, чтобы помочь блокировать постоянные токи, в то же время позволяя переменным токам проходить. Эти компоненты используются во многих различных устройствах и представляют собой невероятно полезный элемент комплекта — большинство электрических продуктов не могут работать без них.

      Здесь, в Allied, у нас есть необходимое оборудование, чтобы настроить вас для любого проекта. Если вам нужны детали конденсатора для работы, обучения или для воплощения уже имеющейся у вас экспериментальной идеи, мы можем предоставить их по доступной цене.

      У нас на складе имеется широкий выбор электрических конденсаторов, которые поставляются ведущими брендами, включая Genteq, Cornell-Dubilier и KEMET.

      Чтобы сделать ваш поиск более целенаправленным и быстрее находить именно то, что вы ищете, используйте наши фильтры. Там вы можете выбирать между различными конденсаторами двигателя по категории, производителю и т. Д.

      В Allied мы сотрудничаем только с лучшими производителями, поэтому вы гарантированно получите продукцию высочайшего качества для выполнения поставленной задачи.Прочтите ниже, чтобы узнать больше о том, что мы можем предложить.

      Нужна дополнительная помощь с вашим заказом? Свяжитесь с нами здесь.

      Что такое конденсаторы?

      Конденсаторы используются для накопления электрических зарядов и их высвобождения по мере необходимости для схемы. Они также блокируют любой постоянный ток, позволяя проходить переменному току.

      Их можно использовать в электронных схемах для выполнения различных задач, включая фильтрацию, обход и сглаживание частот.

      Какие бывают типы конденсаторов?

      Существует шесть распространенных типов конденсаторов. Это:

      • Электролитические конденсаторы
        Они используются, когда требуются конденсаторы большей емкости. Для одного электрода используется тонкий слой металлической пленки, затем для катода используется полужидкий раствор электролита.
      • Слюдяные конденсаторы
        Есть два типа слюдяных конденсаторов — зажимные конденсаторы и серебряные слюдяные конденсаторы.Слюдяные конденсаторы имеют низкие потери и часто используются на высоких частотах. Чаще всего эти типы конденсаторов изготавливаются из мусковита и флогопита слюды, причем мусковит является предпочтительным вариантом с точки зрения электрических свойств, тогда как последний имеет более высокую термостойкость.
      • Бумажные конденсаторы
        Бумажные конденсаторы сделаны между двумя листами фольги, отделенными от бумаги. Затем эту бумагу скручивают в цилиндрическую форму и закрывают с каждого конца пластиковой капсулой.Диапазон емкости конденсатора этого типа составляет от 0,001 до 2,000 мкФ.
      • Пленочные конденсаторы
        В этих конденсаторах используется тонкая пленка, которая иногда металлизируется при производстве в зависимости от свойств конденсатора. Они могут быть изготовлены из полиэфирной пленки, полипропиленовой пленки, металлизированной пленки, полистирольной пленки и пленки ПТФЭ. Пленочные конденсаторы из ПТФЭ часто используются из-за их термостойкости и отлично подходят для аэрокосмической техники.
      • Неполяризованные конденсаторы
        Эти конденсаторы классифицируются как конденсаторы с пластиковой фольгой или электролитические неполяризованные конденсаторы.Неполяризованный конденсатор требует, чтобы приложения переменного тока были параллельны сигналу или источнику питания для правильной работы.
      • Керамические конденсаторы
        Керамический материал используется в качестве диэлектрика с этими конденсаторами и был одним из первых материалов, используемых для изготовления конденсаторов в качестве изолятора. Два типа керамических конденсаторов — это многослойные керамические конденсаторы (MLCC) и керамические дисковые конденсаторы.

      Где можно использовать конденсаторы?

      Конденсаторы могут использоваться в схемах по-разному, а это означает, что их можно использовать в практически бесконечном количестве различных устройств и продуктов.

      Самое популярное место, где можно найти конденсатор, — это вспышка камеры вашего телефона. Конденсатор заряжается током, который затем позволяет вспышке работать. Вы также можете найти конденсаторы, которые используются на шкале настройки радио, чтобы помочь найти правильную частоту, а также предотвратить перегрузку и взрыв динамиков. Таймеры, которые используют непрерывный звуковой сигнал или мигающий свет, также используют конденсатор для завершения этого движения.

      Почему для конденсаторов выбирают Allied Electronics?

      Allied Electronics стремится предоставить вам подходящие расходные материалы по конкурентоспособной цене.Для какого бы проекта или работы вам ни потребовались электрические конденсаторы, вы можете гарантировать, что продаваемая нами продукция соответствует отраслевым стандартам и была испытана и протестирована. У нас есть только самые качественные продукты для ваших задач.

      Покупайте высококачественные электрические конденсаторы в Allied Electronics. Если у вас есть какие-либо проблемы или вопросы о наших услугах и продуктах, свяжитесь с нами. Ищете советы или предложения? Зайдите на сайт нашего эксперта и найдите специальные знания, призванные упростить вашу работу.

      Система Tol-Pal и белки Rgs взаимодействуют, способствуя униполярному росту и делению клеток у Sinorhizobium meliloti

      % PDF-1.4 % 284 0 объект > эндобдж 286 0 объект > поток 2020-02-10T06: 37: 01-05: 002021-07-18T16: 45: 19-07: 002021-07-18T16: 45: 19-07: 00application / pdf

    • Система Tol-Pal и белки Rgs взаимодействуют, способствуя униполярный рост и деление клеток у Sinorhizobium meliloti
    • uuid: 847ced06-1dd2-11b2-0a00-2
      8d5b00uuid: 847ced08-1dd2-11b2-0a00-1e0000000000 конечный поток эндобдж 1 0 объект > эндобдж 2 0 obj > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 79 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 3 0 obj > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 80 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 4 0 obj > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 81 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 5 0 obj > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 82 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 6 0 obj > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 83 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 7 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 84 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 8 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 85 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 9 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 86 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 10 0 obj > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 87 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 11 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 88 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 12 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 89 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 13 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 90 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 14 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 91 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 15 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 92 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 16 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 93 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 17 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 94 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 18 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 95 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 19 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 96 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 20 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 97 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 21 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 98 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 22 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 99 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 23 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 100 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 24 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 101 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 25 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 102 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 26 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 103 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 27 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 104 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 28 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 105 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 29 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 106 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 30 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 107 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 31 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 108 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 32 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 109 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 33 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 110 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 34 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 111 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 35 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 33 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 36 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 34 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 37 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / StructParents 35 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 38 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / StructParents 36 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 39 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / StructParents 37 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 40 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] / XObject >>> / StructParents 38 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 41 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / StructParents 39 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 42 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / StructParents 40 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 43 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / StructParents 41 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 44 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / StructParents 42 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 45 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / StructParents 43 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 46 0 объект > / MediaBox [0 0 612 792] / Parent 1 0 R / Resources> / Font> / ProcSet [/ PDF / Text / ImageC] / XObject >>> / StructParents 44 / Tabs / S / Type / Page >> эндобдж 420 0 объект [423 0 R] эндобдж 421 0 объект > поток HWmo6n`! Ezme-] C3Mɥ; Jxt4f% {xk} V.

      Следующая запись

      Добавить комментарий

      Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *